高效液相色谱分离食用油各组分的定性研究(4)
a.植物甾醇
鲍忠定等人[6] 采用毛细管气相色谱法分离植物甾醇和胆固醇的分析方法，确定样品皂化的最佳条件。色谱柱：DB-5 毛细管柱； NIST质谱谱库，进样口温度300℃，接口温度280℃，柱温275℃，离子源温度230℃，四级杆温度150℃，先确定菜油甾醇、谷甾醇的出峰顺序， 从早到晚依次是5-胆甾烷，胆固醇，菜子甾醇，菜油甾醇，豆甾醇，β-谷甾醇。实验结果是芝麻油中含菜子甾醇233.31（mg/100 g），菜油甾醇75.96（mg/100 g），豆甾醇25.88（mg/100 g），β-谷甾醇202.73（mg/100 g）；大豆色拉油不含菜籽甾醇，含菜油甾醇24.72（mg/100 g），豆甾醇70.40（mg/100 g），β-谷甾醇152.63（mg/100 g）；棕榈油不含菜籽甾醇，含菜油甾醇12.25（mg/100 g），豆甾醇3.17（mg/100 g），β-谷甾醇23.56（mg/100 g）；猪油中含胆固醇31.86（mg/100 g）。
MARI´A JESU´ S LERMA-GARCI´A[7]等人采用高效液相色谱法（HPLC）和质谱（MS）联用技术检测特级初榨橄榄油（EVOOs）中的固醇种类及含量，根据其固醇种类及其遗传多样性建立了一个特级初榨橄榄油的分类法。实验所用的层析柱是dC18（Atlantis,100 × 3mm，3μM, Waters, Milford, MA），用C18柱分离样品。流动相是乙腈/水（含0.01%乙酸），用正离子模式质谱检测。采用HPLC-MS数据的线性判别分析（提取离子色谱图），EVOOs样本采自于吹冰个基因品种的各个地区。 质谱仪系统是惠普1100系列离子阱质谱仪（安捷伦）配备一个大气压电离源。实验发现橄榄油所含的植物固醇随着世界上吹冰个产区的不同，甾醇种类及含量亦有所不同，证实了即使同一种油因产区不同，遗传基因不同，油的化学成分也会不同的猜想。
THOMAS H. J. BEVERIDGE等人[8]采用GC/MS技术分析了西洋参种子油中植物甾醇的含量，实验使用惠普5890系列II气相色谱(Hewlett-Packard, Avondale, PA）仪，备氢火焰离子化检测器。烘箱温度恒275°C。喷油器和检测器的温度分别为280°C和300°C，载气使用氦气。入口压力175 kPa，柱流量为1 mL/min ，峰面积进行记录和计算使用HP3392积分器。该实验定量研究表明，角鲨烯是人参植物甾醇的主要成分，其他β-谷甾醇和豆甾醇是次要的，其中西洋参种子的不皂化物中占有总种子总角鲨烯含量的28%。
Roseli Ap. Ferrari等人[9] 采用凝胶色谱分离-高效液相色谱检测分析工业精炼过程中植物油中甾醇和甾醇酯的改变情况。用硅胶RP-18柱短柱从植物油分离脂肪酸甾醇酯,用高效液相色谱定量测定，蒸发光散射检测器作为β-谷甾醇油酸酯的外部的标准校准。对玉米，大豆和油菜籽油在工业冶炼不同阶段进行分析，其组成的甾醇和脂肪的甾醇酯的分离溶解在500微升石油醚，和20微升的甲醇钠溶液（30%，W / V）中，用高效液相色谱法进行分析。洗脱液为乙腈/甲醇/二氯甲烷（1：1：1，V / V / V），蒸发光散射检测器在不含共轭结构或无紫外吸收物质的分析中具有相当大的优势。实验结果发现在不同的精炼阶段特征甾醇甾醇酯的比例没有实质上的改变。而玉米，大豆，油菜籽油中的脂肪酸酯化甾醇相对那些总酯化脂质的分布有很大的改变。
b.胆固醇
周希雷[10] 依据“GB/T22220—2008食品中胆固醇的测定－高效液相色谱法”中的液相色谱条件以及前处理方法，采取模拟真实样品来建立起标准曲线以及质控实验，同时采用LC/MS/MS质谱仪来实现对样品中胆固醇含量的定性定量检测。LC /MS /MS质谱仪为AB SCIEX 4000 QTRAP （AB SCIEX 公司，配APCI离子源）；高效液相色谱仪为Agilent 1200，液相色谱柱： C18（100mm×4.6mm，5um）；柱温为35℃，流动相：VA（水）∶VB（甲醇）=5∶95的等度洗脱。上述检验中，样品中的胆固醇相对分子质量一般为379.5，而其去掉水分子后其离子其m/z值为370.2， 实验利用MRM-IDA-EPI模式对2对MRM离子进行定量检测，与此同时还能够获得其含量中胆固醇的二级质谱图。