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白芨多糖硫酸酯化工艺条件优化(3)
(3)抗肿瘤及抗病毒
多糖通过活化免疫细胞(巨噬细胞、淋巴细胞),促进细胞因子分泌,活化补体从而提高宿主抗肿瘤免疫功能;多糖通过抗自由基、改变肿瘤细胞膜的生化及超微结构、诱导肿瘤细胞分化与凋亡,发挥直接的抗肿瘤作用。
1.3 多糖硫酸酯化改性方法
1.3.1 氯磺酸-吡啶法
将10mL吡啶置于烧杯中,冰浴搅拌条件下缓慢加入10mL氯磺酸,不断搅拌,待瓶中出现大量淡黄色固体时停止。
取0.5g松塔多糖,用 30ml 二甲基酰胺溶解,搅拌10min。在溶解的样品中加入酯化试剂,85℃搅拌 4h。冰浴冷却至0℃以下,加入 2.5mol/mL的 NaOH溶液,调至中性。加入 3 倍体积95%乙醇,充分混匀,静置过夜,离心,真空冷冻干燥,储存备用。
1.3.2 浓硫酸法
在冰浴条件下,取浓H2SO412mL加入到50mL圆底烧瓶,加入 3mL正丁醇和0.125g硫酸铵于圆底烧瓶,搅拌冰浴至 0℃。将 0.5g松塔多糖缓慢倒入圆底烧瓶中,磁力搅拌半小时,期间保持温度在0℃。然后用 2.5mol/mL的NaOH 溶液,调至中性,将溶液移入透析袋,自来水透析3天,蒸馏水透析1天,然后加入3倍体积 95%乙醇,充分混匀,静置过夜,真空冷冻干燥,储存备用。
1.4 本课题的研究意义和内容
1.4.1 研究意义
近年来,人们对天然产物的研究越来越多,其中植物多糖更是受到人们的青睐。目前,已有将近400种多糖类化合物从天然产物中分离出来,并且已发现了有 100多种多糖具有广泛的药理和生物活性,同时,多糖的改性及其衍生物的生物活性也显得越来越重要。经人们研究发现,多糖具有多种功能,如多糖对巨噬细胞、淋巴细胞的激活作用,多糖对迟发型超敏反应的作用,还有对自然杀伤细胞的毒性增强作用等。多糖的抗氧化效果也成为人们研究的重点,目前对杨桃根、沙棘、海带、当归等多糖的抗氧化功能已有详细报道。因为多糖的结构较为复杂,所以到现在为止多糖的结构和功能的关系还没有完全被掌握。而通过分子修饰来改变多糖的结构,并以此来提高和增加多糖的各种性质便成为了人们研究多糖新功能的重要途径,并且为药物筛选提供了更多的化合物。
白芨中富含白芨胶, 我们对它进行改性修饰,主要是为了获得生产成本比较低廉、生物学活性较高、产物量大且应用广泛的硫酸酯化白芨多糖, 希望可以让白芨和白芨多糖的深度开发以及其在化妆品、医药等领域展示出更加深远的前景。
本课题即以白芨为原料,进行多糖提取、多糖改性工艺优化及其衍生物的保湿性功能测定,以求能够得到提高白芨多糖保湿性功效的方法。并将在以后的工作中开展对白芨多糖改性产物的毒理实验,对其进行更深入的研究。
随着“绿色、环保、崇尚自然”理念的深入人心,天然产物研究已成为科研人员研发热点。糖类广泛存在于自然界;作为生物高分子材料,它是生物体不可缺少的重要物质,是动植物最重要的能量物质和信息传递因子。目前已发现多糖具有多种多样的生物活性功能,如:降血压、抗肿瘤、抗氧化、促进代谢等,在医药、食品和日化保健等方面正发挥着越来越重要的作用。
1.4.2 研究内容
本课题从中草药白芨粉末中提取水溶性多糖,借鉴文献上的提取工艺提取白芨多糖,对白芨多糖进行改性优化,以取代度为指标,用氯化钡-明胶比浊法测定取代度,采用单因素及正交试验对硫酸铵、浓硫酸、正丁醇、时间进行优化。通过使用仪器傅里叶变换红外光谱、X-射线衍射仪和扫描电子显微镜分析其组成,晶体结构和形态相貌结构,对白芨多糖和硫酸酯化白芨多糖进行比较;比较白芨多糖和硫酸酯化白芨多糖的吸湿保湿性能。
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