农药残留检测试纸条在基质中的稳定性测试(2)
胶体金免疫技术是引入胶体金标记物的免疫分析技术，凭借独特的优势,这项技术在近几年快速发展, 已经发展成为一项高效、高灵敏度的免疫检测技术[9]。目前，胶体金免疫层析技术已在动物疾病检测、毒物及药物残留检测、重金属离子监测等方面广泛应用[10]。
胶体金免疫层析技术利用胶体金作为标记物，将其与抗体结合。利用胶体金标记，对抗体与抗原和二抗的免疫反应进行示踪，在试纸条上显现红色线条或消线现象，以此判断待测物的性质。根据胶体金标记目标物的不同,可分为夹心法、间接法和竞争抑制法，本试验使用的是竞争法免疫层析试纸条。其原理是用硝酸纤文素膜(NC膜)作为试纸条的载体，将人工抗原和二抗包被到NC膜上作为检测线和质控线，待测物在流动的过程中与胶体金标记的单克隆抗体结合，抗体和NC膜检测线上人工抗原也会结合, 金标抗体结合位点有限，两个结合反应相竞争，竞争使得待测物浓度与金标抗体结合少时，检测线会显红色；待测物与金标抗体大量结合时，检测线出现消线现象。没有跟检测线包被的人工抗原结合的金标抗体会继续向上流动至质控线与二抗结合，使质控线显红色，若质控线不显红色，则试纸条检测失效。
免疫分析方法在应用中难免会受到基质影响。实际样品及其提取物中常含重金属离子、腐殖质和色素等杂质，这些杂质能干扰免疫反应。免疫分析方法受基质影响会降低稳定性、灵敏度，甚至影响到试验结果[11]。因此，在胶体金免疫试纸条研发过程中进行其在基质中的稳定性测试，以确保试纸条检测结果的稳定可靠。
1 材料与方法
1.1 实验材料与仪器
百菌清、乙草胺、甲霜灵、甲草胺、除草定、甲萘威、吡虫啉、西玛津等农药来自上海农科院。白菜、花生、黄瓜、玉米等采购自南京周边菜市场。百菌清胶体金试纸条、乙草胺胶体金试纸条、甲霜灵胶体金试纸条、甲草胺胶体金试纸条、除草定胶体金试纸条、甲萘威胶体金试纸条、吡虫啉胶体金试纸条、西玛津胶体金试纸条由实验室自行研制。5%甲醇的PBST溶液、80%甲醇溶液、100%甲醇溶液、100%丙酮溶液、80%丙酮溶液、10%丙酮溶液、5%丙酮溶液等试剂为分析纯试剂。冰箱、培养皿、剪刀、研钵、振荡器等仪器由实验室提供。