DNA缺口连接调控铜纳米颗粒的合成策略用于三磷酸腺苷的荧光检测(2)
自从Rotaru等人首先[21]报道以双链DNA（dsDNA）为模板合成荧光铜纳米颗粒（Cu NPs）的技术以来，Cu NPs 已发展成为一种新型荧光指示剂[17-20]。在ds DNA模板存在的条件下，利用抗坏血酸还原 Cu2+ 可以合成具有高强度的荧光Cu NPs，而单链DNA则不能促进这种反应。由于该方法制备的Cu NPs具有良好的荧光性质以及易于合成等优点，它已被用作一种荧光指示剂应用在一些生化分析中 [17-19]。这种反应合成的Cu NPs所展示的优良特性包括易于合成、水溶性好、毒性低、生物相容性、出色的稳定性。尽管如此，Cu NPs在生物分析中的应用仍处于初级阶段，因此利用dsDNA-CuNPs 原理构建荧光生物传感器用于生物分子的检测有十分重要的意义。
本文基于DNA缺口连接调控Cu NPs的合成策略，发展了一种非标荧光方法实现了对ATP的灵敏选择性检测。DNA连接反应在连接酶和其辅助因子ATP共同存在下才能发生，缺口被连接后可以有效阻碍核酸外切酶对DNA的酶切，进而以双链DNA为模版合成Cu NPs，发射强荧光信号。荧光强度与ATP的浓度成正比，通过监测荧光信号的变化可实现对ATP的检测。该方法利用Cu NPs的荧光做信号输出，无需荧光基团标记，降低了检测的成本。另外，利用DNA连接反应辅助因子的原理实现ATP的检测，无需信号放大技术，灵敏度高选择性好。
1实验部分
1.1 实验仪器
荧光分光光度计: Cary Eclipse，安捷伦科技(中国)有限公司；掌上离心机：D1008，大龙兴创实验仪器（北京）有限公司；快速混匀器：XK96-A，江苏新康医疗器械有限公司；台式酸度计：FE20K，梅特勒-托利多国际股份有限公司；电热恒温水浴锅：北京市永光明医疗仪器有限公司；移液器一套：大龙兴创实验仪器（北京）有限公司。
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