添加恶臭假单胞菌后污泥中壬基酚的降解研究(2)
1.3.2泥样的处理
泥样在装罐发酵的过程中，除了要取样处理外，每天上下午还要进行温度的测量。测量温度时需注意温度计插入的位置为泥样的中间部分，这样可以尽可能的减少由于泥样上中下部分发酵温度差异而产生的误差。
本次实验于2014年9月18号开始装罐发酵，准备实验。19号进行一天的发酵，于20号晚上7点左右进行第一次的取样记录。取样时，从每个泥罐中取出15g泥样，用锡箔纸包成正方形做好标记之后放入冰箱中进行冷冻处理，经过24小时的冷冻处理后把泥样从冰箱中取出，用注射器的针头对正方形泥样上的锡箔纸进行扎孔处理，细孔要均匀，然后放入真空干燥仪中进行真空干燥，时间为24小时。将干燥过后的泥样取出来，对其进行碾磨，磨细后进行筛分，然后在筛分后的泥样中取1g样品放入15ml的离心管中。按下面的步骤进行处理
(1)加入10ml二氯甲烷摇匀，放入超声波清洗机中超声10分钟，取出后将离心管液面齐平的两两相对放入离心机中离心10分钟，倒出上清液，然后继续在离心管中加入10ml二氯甲烷，重复上述操作，共2次。
(2)加入10ml甲醇摇匀，放入超声波清洗机中超声10分钟，取出后将离心管液面齐平的两两相对放入离心机中离心10分钟，倒出上清液，然后继续在离心管中加入10ml甲醇，重复上述操作，共2次。
(3)将4次合并的上清液通过滤纸过滤到茄形瓶中。
(4)打开旋转蒸发仪，将温度调至40摄氏度，接上茄形瓶进行旋转蒸发。将茄形瓶蒸发至近干，然后用2ml甲醇（色谱纯）定容至2ml瓶子中，接上氮吹仪进行氮吹，氮吹至干，然后再用2ml甲醇定容。
(5)将玻璃瓶中的样品通过有机滤头过滤至液相测试专用瓶中,然后上机待测。
1.4 HPLC测试
本次实验采用的是高效液相色谱法测定壬基酚的含量。高效液相色谱法为色谱法中一个重要的分支，也是运用最为广泛的仪器分析方法之一[10]。
色谱柱：250mm×4.6mm i.d.×5μm
流动相A 棕瓶 正己烷：异丙醇=93:7 流动相B 白瓶 异丙醇：水=95：5
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