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牛血清白蛋白(BSA)作为蛋白质翻译后修饰的标准品的探索(2)
体内基因表达产物的正确折叠、空间构象的正确形成决定了蛋白质的正常功能,而翻译后修饰在这个成熟过程中发挥着重要的调节作用。因为翻译后修饰使蛋白质的结构更为复杂,功能更为完善,调节更为精细,作用更为专一。并且细胞内许多蛋白质的功能也是通过动态的蛋白质翻译后修饰来调控的; 细胞的许多生理功能,例如细胞对外界环境的应答[1,2],也是通过动态的蛋白质翻译后修饰来实现的。正是这种蛋白质翻译后修饰的作用,使得一个基因并不只对应一个蛋白质,从而赋予生命过程更多的复杂性。因此,阐明蛋白质翻译后修饰的类型、机制及其功能对保障生命有机体的正常运转,预防、治疗相关的疾病有着重要意义。
翻译后修饰是指蛋白质在翻译后的化学修饰。对于大部份的蛋白质来说,这是蛋白质生物合成的较后步骤。蛋白质,或是多肽,是多条或一条氨基酸的链。当合成蛋白质时,20种不同的氨基酸会合并成为蛋白质。氨基酸的翻译后修饰会附在蛋白质其他的生物化学官能团(如醋酸盐、磷酸盐、不同的脂类及碳水化合物)、改变氨基酸的化学性质,或是造成结构的改变(如建立双硫键),来扩阔蛋白质的功能。
1.2 课题的目的
翻译后修饰是指蛋白质在翻译后的化学修饰。对于大部份的蛋白质来说,这是蛋白质生物合成的较后步骤。蛋白质,或是多肽,是多条或一条氨基酸的链。当合成蛋白质时,20种不同的氨基酸会合并成为蛋白质。氨基酸的翻译后修饰会附在蛋白质其他的生物化学官能团(如醋酸盐、磷酸盐、不同的脂类及碳水化合物)、改变氨基酸的化学性质,或是造成结构的改变(如建立双硫键),来扩阔蛋白质的功能。
翻译后修饰在蛋白质加工、成熟的过程中发挥着重要的作用,它可以改变蛋白质的
物理
、化学性质,影响蛋白质的空间构象、立体位阻及其稳定性,进而对蛋白质的生物学活性产生作用,引起蛋白质的功能改变。修饰基团自身的结构特性对蛋白质的性质、功能也会产生深远的影响。在已有的研究基础上,综述蛋白质翻译后修饰的主要类型以及各修饰作用潜在的生物学功能。
蛋白质翻译后修饰的研究基本上可以分为几种目的:
1.调控细胞内许多蛋白质的功能。
2.完善细胞内的许多生理功能。
3.通过质谱仪分析现有化学修饰的修饰情况。
本论文正是基于以上考虑,以牛血清白蛋白为标准品,对蛋白质翻译后修饰进行了研究。
2 牛血清白蛋白翻译后修饰的研究
2.1 牛血清白蛋白(BSA)简介
血清白蛋白(SA)作为一种重要的模式蛋白物是血浆中最为丰富的蛋白质(5 g/100 mL),它与水、ca“、Na+、K+、脂肪酸、氨基酸、激素、类固醇、胆红素以及许多药物均有很好的结合能力,因此在生物体内发挥着转运内源与外源物、调节血液渗透压与pH值的主要作用。如此重要的生理功能,使得不同种属的SA在生化基础研究与药物工业制备中具有极其重要的研究地位与价值,尤其是丰富廉价的牛血清白蛋白(BSA)应用更为广泛,如分离科学、蛋白质组学等。
牛血清白蛋白在生化实验中有着广泛的应用。牛血清白蛋白(BSA),又称第五组分,是牛血清中的一种球蛋白,包含583个氨基酸残基,分子量为66.430 kDa,等电点为4.7。牛血清白蛋白是牛血清中的简单蛋白,是血液的主要成分(38g/100ml),分子量68kD。等电点4.8。含氮量16%,含糖量0.08%。仅含已糖和已糖胺,含脂量只有0.2%。白蛋白由581个氨基酸残基组成,其中35个半胱氨酸组成17个二硫键,在肽链的第34位有一自由巯基。白蛋白可与多种阳离子、阴离子和其他小分子物质结合。血液中的白蛋白主要起文持渗透压作用、PH缓冲作用、载体作用和营养作用。在动物细胞无血清培养中,添加白蛋白可起到生理和
机械
保护作用和载体作用。
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