HPLC多相酶促合成咖啡酸苯乙酯的工艺设计及微反应器强化(5)
当底物足够多时，酶充分反应，反应速率会随着酶量的增加而增加。当酶量加到一定程度时，酶对反应速率影响减小。
1。3。2介质
以前酶催化都选择水为反应介质，这是由于在水与有机溶剂的混合体系中酶容易失活，反应无法进行，所以人们认为水才是最好的反应介质。后来有研究发现酶在微水或者无水的有机溶剂体系中表现出水为反应体系没有的优点，例如酶的立体选择性和热稳定性。由于酯化反应的产物不溶于水，如果用水作为反应介质，不利于反应的进行，所以选择可以溶解酯化产物的非水体系作为反应介质[19]。
张艳[20]等研究了在不同有机溶剂的反应介质中脂肪酶催化合成己酸乙酯，结果发现选择环己烷作为反应介质时转化率最高，可达到90%以上。但是选择有机溶剂作为反应介质时，有机溶剂或多或少会对酶有毒害作用，对酶的活性有影响。刘庆芬[21]等利用离子液体双水相萃取分离青霉素，离子液体作为反应介质时比较温和，不会对反应物、酶和产物产生影响，是一种绿色环保的溶剂[22, 23]。
1。3。3 pH
反应pH是酶促反应的重要参数，选择合适的pH可以使反应的速率达到最大，也可以降低对酶的损伤，延长酶的使用寿命。但是反应的pH超过一定的范围时，酶的空间结构会受到破坏，酶的活性大大降低，反应效率受到影响。一般来说，pH在6~9对酶的结构没有太大影响，酶的催化活性可以最大程度的表现出来。
1。3。4 温度
温度对酶的活性有很大影响，在合适的温度范围内，酶的催化活性随着温度的增加而提高，当温度超过一定范围时，对酶的结构产生影响，酶的催化活性降低。因此在酶促反应中要考虑反应温度对酶的影响，最大程度利用酶的催化活性。来.自^优+尔-论,文:网www.chuibin.com +QQ752018766-
1。3。5底物摩尔比
脂肪酶催化底物进行酶促反应,反应物的摩尔比影响了酶催化合成的效率。丁健桦[24]等在合成阿司匹林实验中将催化剂水杨酸的用量保持不变，改变水杨酸与乙酸酐的摩尔比发现阿司匹林的转化率有明显的变化。在水杨酸与乙酸酐的摩尔比为1：2。5时阿司匹林转化率达到最大，可以达到73。6 %。因此筛选合适的反应物摩尔比可以提升产物的得率。
1。3。6时间
反应速率不是一直随时间的增加而增加的，在一定时间后，反应速率反而随时间的增加而下降。这是由于随着反应时间的增加，反应底物在逐渐积累，过多的底物会对酶促反应产生抑制作用。
1。4微反应器酶促合成
1。4。1微反应器
“微反应器”（Microreactor）一开始是指一种用于测试催化剂的动力学研究的小型管式反应器，微反应器的直径一般约为10 mm。随着原本用于电路集成的微制造技术高度发展和推广到各种化学领域，此时的“微反应器”是一种用特殊微技术加工固体基质制成的可用于进行化学反应的三维结构元件[25]。微反应器内用于液体流动的微通道直径尺寸在亚微米到亚毫米之间，所要求的化学反应在这些通道内进行。因此，微反应器又被叫做“微结构”或“微通道”反应器[26]。