桑黄子实体多糖的分离纯化+文献综述(4)
周勇[ ]从桑黄菌丝体分离出三种单一多糖PI11、PI21、PI31，碘反应呈阴性，说明不含连续的α(1→4)糖苷键，且光谱显示其构型都为β型。LIU Y H[ ]等从Phellinus ribis子实体中分离出水溶性多糖PRP，经鉴定PRP是一种分子量为8.59 kDa的 β-D-葡聚糖，其主链由(1→4)和(1→6) 2种形式链接, 支链由(1→3)链接。WU M J[ ]等从P. igniarius液体深层发酵菌丝体中分离出均一多糖PIP1，分子量为17k Da，糖组成为：葡萄糖、半乳糖和甘露糖，比例为3.70: 4.06: 1.00；GC-MS分析鉴定其糖苷键为β构型，且主链由(1→3)-葡萄糖和(1→4)-甘露糖构成，侧链由(1→3,6)-葡萄糖和(1→4,6)-甘露糖构成。
Hwang H J[ ]等从Phellinus linteus KCTC 6190桑黄发酵菌丝体的胞外液中提取粗多糖EPS，采用凝胶柱Sepharose CL-4B从EPS中分离得到3种组分：Fr-I，Fr-II和Fr-III，分子量分别为433400 (±7801), 31470 (±283), 12950 (±90)，其中Fr-I的分子构型是球形，Fr-II在水溶液中是随意卷曲的。
1.2 桑黄多糖的分离技术
桑黄多糖主要从桑黄子实体和菌丝体中提取获得，野生的桑黄子实体价格昂贵，生长周期长，目前国内已经开始批量人工栽培桑黄子实体。发酵的桑黄菌丝体冷冻干燥后，可以提取胞内多糖，而胞外液浓缩醇沉可以得到胞外多糖。
多糖的分离技术很多，主要有分级醇沉、超滤法、大孔树脂吸附纯化、离子交换层析和凝胶过滤等。不同浓度的酒精沉淀得到的桑黄多糖分子量不同，一般采用分级醇沉的方式对桑黄多糖进行初步分离得到不同分子量段的桑黄粗多糖组分，低浓度的酒精醇沉得到大分子的多糖，而高浓度的酒精醇沉得到的多糖分子量较低[ ]。
从桑黄子实体或菌丝体中提取的粗多糖中往往混有蛋白质、色素等杂质，去除色素是关键步骤之一。大孔树脂因其成本低、工艺简单、效率高、再生性强、可重复使用等优点广泛应用于真菌多糖的脱色[ ]。利用大孔吸附树脂可去除桑黄粗多糖中的蛋白及色素，分离得到的多糖纯度较高。张惠洋[ ]等比较了5种大孔树脂对桑黄粗多糖的吸附和解吸效果，结果发现D-101-I树脂对蛋白的吸附率达到90.54%，解吸附率仅为8.71%；对多糖的吸附率达68.67%，解吸率为47.95%，因此达到脱除蛋白、多糖损失不大的效果。
超滤法是根据膜分离过程原理，以选择性透过膜为分离介质，当膜两侧存在某种推动力(如压差、浓度差、电位差等)时，原料侧组分可选择透过膜，从而达到分离提纯的过程。与传统方法相比，超滤具有操作简单、条件温和无成分破坏、易于控制和文护等特点，是一种节能环保的分离技术[ ]。杨焱[ ]采用不同截留分子量的中空纤文膜对桑黄粗多糖进行超滤，分别得到三个不同的粗多糖组分，但是由于超滤的终点判断较难，超滤不完全，超滤分离得到的组分多糖含量相对较低。
离子交换层析和凝胶过滤方法是目前用的比较多的多糖分离方法，一般将二者结合使用。离子交换层析得到的样品进行分析，如果组分不单一，继续用凝胶柱进一步分离得到单一组分。离子交换层析是依据流动相中的组分离子与交换剂上的平衡离子进行可逆交换时结合力的差别而进行分离的一种层析方法。凝胶过滤法是利用分子筛原理，将不同分子尺寸的分子进行分离。一般采用弱阴离子柱层析DEAE-Sepharose Fast Flow和聚丙烯酰胺凝胶Sephacryl S100, S200, S300, S400来分离桑黄多糖。葛青[ ]等将桑黄水溶性多糖，经DEAE-Sepharose Fast Flow离子柱和Sephacryl S-400 High Resolution凝胶柱进行分离纯化得纯多糖PBF6，建立了一种多糖的分离纯化的方法。
1.3 桑黄多糖的生物活性
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