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小米糠中阿拉伯木聚糖的分离提取研究(3)
1.3小米糠中水溶性阿拉伯木聚糖的提取
1.3.1脱脂小米糠细度的筛选
(1)小米糠细度分别为20-40、40-60、60-80、80-100、>100目[2],分别取5g不同细度脱脂小米糠,50mL蒸馏水于150mL锥形瓶,搅拌混匀。
(2)在95-100°C水浴糊化15 min后置于水浴振荡器中,于50°C水浴振荡30 min。
(3)调体系pH至5.5,加入耐高温α-淀粉酶0.25g[3],于95°C振荡1 h。
(4)调pH至4.2,加入0.015g糖化酶于60°C酶解1 h。
(5)调pH至7.0,加入0.18g中性蛋白酶,于55°C酶解2 h。
(6)将反应混合物置于沸水浴中灭酶15 min。
(7)冷却至室温后,9000r,4℃条件下离心。
(8)水洗沉淀并离心,合并上清液,并定容之100mL,测定上清液的AX的含量。
1.3.2小米糠料液比的筛选
(1)分别取5g100目的脱脂小米糠,按1:6、1:8、1:10、1:12、1:14的比例加30、40、50、60、70mL蒸馏水于150mL锥形瓶,搅拌混匀。
(2)在95~100°C水浴糊化15 min后置于水浴振荡器中,于50°C水浴振荡30 min。
(3)调体系pH至5.5,加入耐高温α-淀粉酶0.25g,于95°C振荡1 h。
(4)调pH至4.2,加入0.015g糖化酶于60°C酶解1 h。
(5)调pH至7.0,加入0.18g中性蛋白酶,于55°C酶解2 h。
(6)将反应混合物置于沸水浴中灭酶15 min。
(7)冷却至室温后,9000r,4℃条件下离心。
(8)水洗沉淀并离心,合并上清液,并定容之100mL,测定上清液的AX的含量。
1.4小米糠中水不溶性阿拉伯木聚糖的分离提取研究[4]
1.4.1纤文素酶酶解温度的确定
(1)脱脂米糠经脱蛋白、淀粉处理,并取5 g,加入50mL 乙酸-乙酸钠缓冲液(pH 4.5),搅拌均匀。
(2)按照5g/L比例加入纤文素酶,混匀,在40、45、50、55、60°C中水浴作用1h。
(3)沸水浴中灭酶15 min。
(4)抽滤,上清液适度浓缩,加入4倍体积的95%乙醇醇沉过夜。
(5)抽滤,充分烘干得到AX粗物,测定AX的含量,并计算提取产率。
1.4.2纤文素酶酶解时间确定
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