番茄WRKY31和WRKY33沉默载体构建及其功能验证(2)
前期研究对番茄白粉菌（Oidium neolycopersici）侵染番茄 Micro-tom（MT）进行转录组测序，在植病互作途径发现 WRKY31 和 WRKY33 这两个基因相对表达量均有所变化，因 MT 为白粉菌的感病材料，猜测 WRKY31 和 WRKY33 这两个基因可能参与了抗病途径。研究者通过构建水稻、拟南芥和番茄的 WRKY基因进化树了解，番茄的 WRKY31 和 WRKY33 与拟南芥的 WRKY33 高度同源，而拟南芥转录因子 WRKY33 在受几丁质、紫外线、水杨酸以及病原菌 Botrytis cinerea 和 Pseudomonas syringae 的侵染后诱导表达，且其是抵抗腐生真菌的一个必须的转录因子，同时也参与茉莉酸（Jasmonic，JA）和水杨酸（Salicylic，SA）途径[5-8]。也有研究者发现 WRKY33 在上游调控了番茄自噬并参与其抗热途径[9]。由此说明番茄的 WRKY31 和 WRKY33 可能参与了多种信号转导通路。
本实验以番茄 MT 为材料，利用病毒诱导的基因沉默技术，构建 WRKY31 和 WRKY33 基因沉默表达载体，并对其进行功能验证。同时本研究采用腐生病菌-大丽轮枝菌（Verticillium dahliae）、活体寄生真菌-白粉菌（Oidium neolycopersici）以及共生真菌-丛枝菌根（Glomus versiforme, G. mosseae）等微生物处理 MT，利用 Real-Time qPCR技术定量分析诱导后基因表达量变化。同时分析了 WRKY31 和 WRKY33 基因在番茄 MT 的空间表达情况。以期通过以上研究对番茄 WRKY31 和 WRKY33 的功能进行系统的研究，并阐释其可能在植物与微生物互作过程中的重要作用。
下一篇：杏鲍菇液体发酵研究