2。3通过孢子萌发率确定最低抑菌浓度、P。 digitatum芽管长度的测量来*自~优|尔^论:文+网www.chuibin.com +QQ752018766*

将分离的病原菌P。 digitatum接种在PDA培养基上，25 ℃培养箱中培养1周，收集孢子。将P。 digitatum孢子悬浮液等量加入到含有100 ml PDB培养基的250 ml三角瓶中，调节孢子终浓度为1。0×106 spores·mL-1，分别加入不同量的癸醛（0、5μl、10μl、15μl、20μl、25μl）。25 ℃、200 rpm振荡培养，分别在5、7、9、11、12h后用光学显微镜统计孢子萌发率（当芽管长度大于等于孢子直径的1/2时视为孢子萌发），确定癸醛作用的最低抑菌浓度（Minimum inhibitory concentration，MIC，本文指相同培养时间空白组孢子萌发率≥85%时，处理组孢子萌发率≤10%时的浓度），并分别在5、7、9、11、12h后利用显微镜镜头标尺测量最低抑菌浓度处理组芽管的长度。每种处理随机统计100个孢子的萌发率及芽管长度，三次重复，整个实验重复两次。

2。4 P。 digitatum菌落扩展的测量

将P。 digitatum在PDA培养基上培养1周后，在超净台上加入无菌水和助融剂Tw-20，用三角刮刮取孢子，制得孢子悬浮液，经四层纱布过滤后得孢子溶液。随后在空白PDA培养基上涂布。同时在PDA上取三点，各自相差120°，形成三角状，加入不同抑菌浓度的癸醛（分别是1μl和2μl）。25 ℃培养，分别在培养1、2、3、4、5 、6d后测量长满菌落的培养基上抑菌斑的直径（每种处理五次重复）