(2)测序反应:采用东胜 EDC-810PCR 仪进行连接反应,连接反应体系包括:PCR 产物 3 ul,加 10×Taq DNA 连接酶缓冲液 1 ul,Taq DNA 连接酶 5 U,10 pmol/L 探针 每条 0。01 ul,加 ddH2O 至 10 ul。条件为 94℃ 30s,56℃ 3min,循环 30 次。连接反应结 束后,取 1 ul 连接产物,8 ul 上样缓冲液,95℃变性 3min,立即冰水浴,最后上 ABI3730XL 测序仪测序。

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