5

1。2。2乙基多杀菌素抗虫活性及作用机制 6

1。2。3乙基多杀菌素的应用及研究进展 6

1。3  微生物育种的国内外研究进展 6

1。4  UV 7

1。5  研究的目的及意义 7

2。 实验部分 8

2。1  实验材料及仪器 8

2。1。1菌种 8

2。1。2仪器设备 8

2。1。3试剂及培养基 9

2。2  实验操作方法及步骤 11

2。2。1本研究的技术路线 11

2。2。2 菌种保藏 11

2。2。3 CH2琼脂平板培养 12

2。2。4 CH2的斜面培养 12

2。2。5 单孢子悬液的制备 13

2。2。6 甘氨酸抗性筛剂的最小抑制浓度 13

2。2。7 UV诱变最佳照射时间的筛选 14

2。2。8 UV诱变筛选甘氨酸抗性突变株 14

2。2。9种瓶培养 15

2。2。10发酵摇瓶培养 16

2。2。11组分检测 17

3 结果与讨论 17

3。1  甘氨酸的最小抑制来自优Y尔L论W文Q网wWw.YouERw.com 加QQ7520~18766 浓度 17

3。2  UV诱变致死率 18

3。3  UV诱变后菌落的形态变化 19

3。4  乙基多杀菌素含量的检测 20

4 总结与展望 21

文献 22

致谢 23

1 引言

1。1  杀菌素概述

多杀菌素又名多杀霉素(Spinosad),它是由刺糖多孢菌(Saccharopolysporaspinosa)在培养介质下经有氧发酵后产生的次级代谢产物。从结构上看,它属于大环内酯类,并且还是一种大环内酯类无公害高效生物杀虫剂。其亲本菌株-刺糖多孢菌(Saccharopolysporaspinoa)最初分离来自于加勒比的一个废弃的酿酒场,在环境中通过多种途径组合的方式进行降解,主要为光解和微生物降解[1]。其结构式如下:

图 1 多杀菌素的结构图

多杀菌素的作用机制比较新颖和独特,不同于一般的大环内酯类化合物,其独特的化学结构决定了其独特的杀虫作用机理。多杀菌素有快速触杀和摄食毒性的功能,它能使昆虫的神经出现特有的中毒症状,它的作用机制是通过刺激昆虫的神经系统,增加其自发活性,导致非功能性的肌收缩、衰竭,并伴随颤抖和麻痹,多杀菌素作用于烟碱乙酰胆碱受体(nAChR),多杀菌素同时也作用于γ -氨基丁酸(GABA)受体,改变GABA门控氯通道的功能,进一步促进其杀虫活性的提高,因此多杀菌素在过去二十年中已被注册为杀虫天然产品,主要用于防治野外作物害虫,还有一些家庭害虫如蚊子和家蝇[2]。

1。2  乙基多杀菌素的概述

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