菊芋块茎提取物对小鼠高血糖的缓解作用(3)
菊粉：纯度90.08%。
药物：盐酸二甲双胍片（规格：0.5g/片），中美上海施贵宝制药有限公司生产，批准文号：H20023370。
血液指标：由江苏省中西结合医院检测，提供数据，血液检测仪器为Cobas 8000（罗氏诊断产品（上海）有限公司，德国）。
小鼠饲料：普通基础饲料由南京农业大学动物实验中心提供，其配方按照《实验动物环境及设施国家标准（GB14925-2010）》中的“实验动物配合饲料营养成分（GB14924.3-2010）”配制。MD12032（45% fat Kcal%）高脂饲料购买于江苏美迪森生物医药有限公司。饲料配方如下表所示：
表1 高脂饲料的组分含量（%）
组分名称Name of component 总计百分比/gm Percent of total/gm
酪蛋白 23.31%
L-胱氨酸 0.35%
玉米淀粉 8.48%
麦芽糊精 11.65%
蔗糖 20.14%
纤文素 5.83%
植物油 2.91%
猪油 20.68%
复合矿物质 1.16%
磷酸二钙 1.51%
碳酸钙 0.64%
一水合柠檬酸钾 1.92%
复合文生素 1.16%
酒石酸氢胆碱 0.23%
色素 0.005%
2.2仪器与设备
罗氏血糖仪活力型 德国罗氏诊断有限公司
罗康全活力型血糖试纸 德国罗氏诊断有限公司
Allegra 64R离心机 南京百奥生物科技有限公司
HS-800D恒温水槽 太仓市科教器材厂
JY10002电子天平 上海良平仪器仪表有限公司
AL204电子天平 梅特勒-托利多仪器（上海）有限公
WH-861旋涡混合器 太仓华利达实验设备有限公司
eppendorf 5424离心机 北京昊成铭泰科技有限公司
2.3研究方法
2.3.1 Ⅱ型高血糖小鼠模型的建立
本研究采用中西医结合的试验性方法建立Ⅱ型糖尿病动物模型，即饲喂高脂饲料后空腹胰岛素值偏高且注射STZ后，空腹血糖大于11.11mmol/L的C57BL/6J小鼠选为糖尿病模型成模小鼠， 将C57BL/6J小鼠适应性喂养7天。按体重随机分成6组，每组10只。禁食不禁水12h后剪尾采血，血糖仪测定各组小鼠的初始血糖值。将其中1组作为正常对照组小鼠，饲喂普通饲料，正常饮水；造模组小鼠饲喂高脂饲料，正常饮水。在饲喂高脂饲料28天后腹腔注射STZ（50 mg•kg-1），连续注射7d，正常对照组注射枸橼酸钠缓冲溶液，连续注射7d。于最后1次注射72h后，剪尾采血，血糖仪测血糖，血糖值>11.1mmol/L的小鼠为高血糖模型成模小鼠。
2.3.2 高血糖小鼠的重分组及处理
利用已经构建成功的模型小鼠进行后期的菊粉干预作用试验。干预时间为4周，干预手段为对小鼠进行灌胃处理，灌胃在每天上午进行。空白对照组、高血糖对照组灌胃的为生理盐水（浓度为9.0‰ w/v，4℃），阳性药物组则灌胃的为市面上常用来治疗高血糖的常用药盐酸二甲双胍片，按每只0.125g/（kg•d）剂量对高血糖模型小鼠进行灌胃，而菊粉处理组则按照人体推荐量（World Health Organization，1990）的5、10、20倍设计菊粉低、中、高3 个剂量组对高血糖模型小鼠进行灌胃。具体分组见表2。
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