紫苏挥发油抗肿瘤活性研究(3)
实验证明了紫苏挥发油具有显著的抗肿瘤作用，但是紫苏油抗肿瘤的作用机制还需要进行深层次的实验研究。在进一步的实验中，设计实验找到紫苏油的作用靶点，以便更好的利用紫苏油进行肿瘤的治疗，提高其靶向性与治疗效率。另一方面，紫苏油为多种化合物的混合物，成分复杂，可能含有几十种或上百种化学成分，很难证实紫苏油中真正起作用的成分，以及每种成分各自的作用[10]。这些方面有待进一步的研究。本次实验只是在细胞水平上进行的，还需要进行动物实验，才能用于医学治疗。
1 材料与方法
1.1供试材料
10个产地紫苏油(浙江、湖南、江西、甘肃、广西、贵州、四川、湖北、河南、江苏，4 ℃保存)；
1.2细胞
A549细胞；
1.3试剂
F-12k培养液；胎牛血清FBS；10000 U/ml氨苄青霉素；10 mg/ml链霉素；0.25%胰酶；磷酸缓冲液PBS；二甲基亚砜DMSO；四甲基偶氮噻唑蓝MTT；台盼蓝；RIPA裂解液；BCA蛋白浓度测定试剂盒；5×loading buffer（含有溴酚蓝和SDS）；1M DTT；30% PAGE；1.5M Tris(PH8.8，PH6.8)；10% SDS；10% APS；TEMED；running buffer（25 mM Tris，250 mM 甘氨酸，0.1% SDS）；湿转缓冲液(48 mM Tris，39 mM 甘氨酸，20% 甲醇，0.0375% SDS)；NC膜；脱脂奶粉；PBST（PBS，0.1% tween-20）；一抗(caspase-8, caspase-3, Bcl-XL, Bcl-2, P53, HSP70, PARP, GAPDH)；二抗
1.4细胞培养
实验中使用A549细胞，25 ㎝2培养瓶，培养液是F-12k。其中含有10% FBS、100 U/ml氨苄青霉素和0.1 mg/ml链霉素。培养条件为37 ℃，5% CO2，保持一定的湿度。细胞每三天传代一次。
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