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断奶仔猪沙门氏菌肠炎模型的建立(2)
1 材料与方法1.1 材料
1.1.1 试验动物将 12 头 21 日龄断奶仔猪按照体重随机分为两组:空白对照组(CN,n=6)、沙门氏菌组(ST,n=6),试验期 17 天,饲养 17 天后,在第 18 天屠宰。
1.1.2 试验菌株本实验所用致病菌株婴儿沙门氏菌 6,7:r:1,5 为临床分离株,本实验室分离保存。1.1.3 主要试剂1)沙门氏菌的分离培养 LB 营养肉汤、XLD 沙门氏菌选择性培养基,购自北京奥博星
生物
技术有限公司; 沙门氏菌血清型鉴定试剂盒, 购自宁波天润生物药业有限公司;DNA 提取试剂盒,购自天根生化技术有限公司。2)沙门氏菌感染断奶仔猪体温测定 动物肛温测量体温计、甘油3)血常规检测 10mL注射器、紫帽 EDTA 抗凝剂采血管、载玻片、盖玻片、细胞计数板、瑞士染色液,购自珠海贝索生物技术有限公司。4)石蜡切片制作及 HE 染色 4%多聚甲醛、梯度酒精、无水乙醇、二甲苯、石蜡、苏木精-伊红染液购自北京艾德莱生物科技有限公司,载玻片、盖玻片、中性树胶、切片机、摊片机、烤片机、石蜡包埋机等。
1.1.4 主要仪器设备本试验所用仪器设备见表 1-1。仪器设备名称 购买公司SW-CJ-IFD 净化工作台 中国苏州净化工作厂NanoDrop® ND-2000C 分光光度计 美国 Thermo fisher Scientific 公司-80℃超低温冰箱 日本 SANYO 公司微波炉 广东格兰仕公司MILLIQ 超纯水仪 美国 MILLIPORE 公司立式压力蒸汽灭菌器 上海博讯实业有限公司医疗设备厂制冰机 中国雪科公司漩涡震荡仪 美国 BIO-RAD 公司TDZ5-WS 多管架自动平衡离心机 中国湘仪公司MEK-6318K半自动血细胞计数仪 日本 Nihno Kohden公司表 1-1 试验用主要仪器设备1.2 方法1.2.1 试验设计12 头 21 日龄断奶仔猪随机分成 2 个试验组,每组 6 头,2 个试验组分别是空白对照组(CN)、沙门氏菌组(ST)。整个试验周期为 17 天,包括攻菌前饲喂 7 天和攻菌后饲喂 10 天,饲养 17 天后,在第 18 天屠宰。
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