表1

EP管

 试剂 BSA control BSA MDA BSA 

MDA

PE

100ppm BSA

 MDA

PE

200ppm BSA MDA

PE

500ppm BSA MDA

EC

0。5mM BSA MDA

EC

1mM BSA MDA

EC

2mM BSA MDA

PM

BSA(mL) 0。5 0。5 0。5 0。5 0。5 0。5 0。5 0。5 0。5

PBE ( μL) — — 5 10 25 — — — —

EC( μL) — — — — — 12。5 25 50 —

PM( μL) — — — — — — — — 25

MDA(mL) 0 0。1 0。1 0。1 0。1 0。1 0。1 0。1 0。1

PBS(mL) 0。5 0。4 0。395 0。39 0。375 0。3875 0。375 0。35 0。375

3。2  SDS-PAGE电泳法检测蛋白修饰程度

实验步骤：

（1）清洗干净的八块玻璃板，晾干后按要求装配好；

（2）按下表2配制分离胶；

（3）将分离胶注入玻璃板夹层中。凝胶液加至约距前玻璃板顶端1。5cm（距梳子齿约0。5cm）；     

（4）在分离胶溶液上覆盖蒸馏水以封胶（略溢出玻璃板边缘）；

（5）静置约30 min，若在分离胶与水层之间可见一个清晰的界面，表明凝胶已聚合

（6）倒去蒸馏水；来*自-优=尔,论:文+网www.chuibin.com

（7）按下表3配制浓缩胶；

（8）将浓缩胶注入玻璃板夹层中（分离胶之上），加至玻璃板边缘，略溢出，迅速插入点样梳；

（9）静置约30min，待其凝固后将点样梳拔出，用10倍的电泳缓冲液稀释液冲洗加样槽，去气泡；