三萜酸的LC/MS测试方法学研究(3)
1.1 三萜酸的LC/MS测试方法国内外研究现状概述
1.2 液相色谱
1.2.1 液相色谱
液相色谱是用流体作为流动相的色谱的一种名称。液相色谱-质谱串联的操作性、选择性、灵敏度是业界内公认的非常有可行性的一种实验工具，液相色谱通常适用于检测不易检测的物质，如这个样品不易被分离出，或者是存在在样品的被测物质对实验的反应度低，又有些情况是经过人工处理样品的步骤程序都很繁杂，很费时间等因素。这些情况下的实验往往不是很容易着手。而用了液相色谱，这样的问题就能迎刃而解了，解决了研究时的困扰，这些究起来难度很高的样品只要经过LC/MS，稍加操作就能立刻得到强而有力的分析，即使在LC难分离，条件有限制，LC.NMS也能轻易得到你想要的数据。LC-MS联用的优点不胜枚举，因为现阶段的一些被熟知的方法例如气相色谱只能分离易挥发的物质，对于不能分解的物质只能束手无策，而本课题研究的LC/MS液相色谱-质谱联用的仪器就把分离的范围大大拓宽了，而限制实验进行的条件却大大降低了，这绝对是当下值得被推崇的科学检测方法。
液相色谱发起的时代是在上世纪的70年代[1]，已广泛运用于农业，医学，石油勘探，化学及食用级的染料，天然产物，生物界，无机物有机物，及化学和高聚物的分离。
1.2.2 液相色谱的分析原理
液相色谱的基本原理是确定你所要做实验的样品，这个样品应该是要经过提纯的，这样对于机器检测该样品中的成分才能更加方便，继而将该样品再进行预处理环节，进而取适量的样品加注到仪器中，这个适量也是有要求的，一般要求的加样量不多，在微量之间，进样之后起动系统内的高压泵，样品被流动相带入色谱柱内，此时的流动相应该是经过配比的，在一定高压下，仪器进行运作，这个运作过程就是无数次的交换发生在样品在柱子内充当填料的固定相与流动相之间，并按该样品所含有的物质在固定相和流动相之间的一些因素进行分离，一般测试中常见的因素是分配系数、分子极性大小以及所带的电荷数的多少等，通过检测器检测，经过一段你所设置的时间，会产生一个波谱图，学者可以根据峰面积进行精确地计算，这样一来便得出了样品中的所要测量的某种物质的含量[2]。
1.2.3 液相色谱的发展
液相色谱法是最早被发明的，但至今来看它的发展却没有意想中的快，在液相色谱法普及之前，纸色谱法（1944年）、气相色谱法（1952年）和薄层色谱法（1956年）是色谱分析法的主流[3]。经典色谱法是重力加料，流出速度极慢，所以古典液相色谱法表现出的弱点是柱效低、分离时间长，难以解决复杂混合物的分离。要提高柱效，就要把固定相的颗粒度减小，同时要加快传质速率；要缩短时间就要把流动相的速度加快。因此要克服古典液相色谱的缺点，就必须要研制出粒度小、传质速率快的固定相；使用高压泵，加快流动相的速度；采用高灵敏度的检测技术，从而使液相色谱达到柱效高、分析时间段、灵敏度高的特点。
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