RE-Ag渗滤法制备TNNI3K浓度的检测试剂盒(2)
2.3.1 纳米银的制备 9
2.3.2 RE微粒的制备 9
2.4 试剂盒的制备 10
2.4.1 硝酸纤文素膜的预处理 10
2.4.2 纳米银标记二抗 10
2.4.3 试剂盒的组装 10
2.4.4 一抗的包被 10
2.4.5 封闭 10
2.4.6 TNNI3K抗原浓度的检测 10
2.5 试剂盒工艺参数的研究 10
2.5.1 纳米银标记二抗pH的选择 10
2.5.2 二抗合适标记量的确定 11
2.5.3 NC膜的预处理 11
2.5.4 一抗浓度的选择 11
2.5.5 封闭剂的选择 11
2.5.6 银染液的选择 11
2.5.7 RE微粒及RE-二抗的银染效果 11
2.5.8 RE与Ag混合比例的确定 11
2.5.9 TNNI3K浓度的检测试剂盒检出限的测定 12
2.5.10 Ag-二抗-RE银染效果 12
2.6 表征 12
2.6.1 纳米银与Ag-二抗的UV-Vis吸收光谱 12
2.6.2 纳米银Zeta电位的测定 12
2.6.3 RE微粒的UV-Vis吸收光谱 12
2.6.4 RE-Ag微粒与RE-Ag-二抗的UV-Vis吸收光谱（RE：La、Ce、Sm、Nd） 12
3 实验结果与分析 12
3.1 试剂盒工艺参数的选择 13
3.1.1 纳米银标记二抗pH的选择 13
3.1.2 二抗合适标记量的确定 13
3.1.3 硝酸纤文素膜预处理 13
3.1.4 一抗浓度的选择 14
3.1.5 封闭剂的选择 14
3.1.6 银染液的选择 15
3.1.7 RE微粒及RE-二抗的银染效果 15
3.1.8 RE与Ag混合比例的确定 16
3.1.9 RE-Ag检出限的测定 18
3.1.10 Ag-二抗-RE微粒银染效果 18
3.3 表征 18
3.3.1 纳米银和Ag-二抗的UV-Vis吸收光谱 19
3.3.2 纳米银Zeta电位的测定 19
3.3.3 RE微粒的UV-Vis吸收光谱 20
3.3.4 RE-Ag微粒与RE-Ag-二抗的UV-Vis吸收光谱（RE：La、Ce、Sm、Nd） 23
4 结论 26
致谢 27
参考文献 28
1引言
1.1诊断试剂盒的研究现状
1.2 RE微粒的应用及制备方法
1.2.1 RE在生物检测中的应用
我国拥有的RE资源非常丰富，因此开展研究关于RE在生命科学应用前景是相当大的。在生命科学、临床诊断、生物标记研究中，RE荧光材料经常应用在生物芯片的研究方面。然而，在传统的荧光测试中，往往会受到生物样品、仪器的背景干扰，因此，荧光染料在生物中的应用得到了极大的限制[5]。目前关于纳米材料在免疫检测中的应用，研究最多的是RE络合物，它具有最大的Stokes位移，当Stoke位移达200 nm时，很容易分辨激发光和发射光，从而排除激发光的干扰。与其它材料相比较，RE纳米材料具有很多特点，如RE纳米材料的荧光极强，另外，它具有Stokes位移较大，光学性能稳定，荧光寿命较长等优势，这些优势在生物分析上、临床检测中都有着非常好的应用。至今已经有大量文献报道了RE荧光材料用于免疫检测。用无机二氧化硅纳米粒包覆RE络合物的荧光材料在生物检测中应用最广泛，这种新发明具有低成本，制备简单，便于广泛应用的优点。
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