叶酸修饰PEI生物相容性微囊的研制及药物释放性研究(2)
尽管现在很多药物运载系统表现出了相当好的肿瘤靶向性，通过受体-配体、抗原-抗体之间特异性的结合将药物主动靶向至肿瘤细胞表面，但一方面由于入胞能力较弱，并不能提供足够高的胞内药物浓度，而另一方面细胞毒性药物必须进入细胞才能发挥作用，因而无法有效抑制肿瘤细胞的生长，特别是具有多药耐药性的肿瘤细胞；并且载体在胞外也会经过扩散释放药物，有可能重新分布到正常组织中，降低靶向药物的特异性。因此，生物活性分子的细胞内转运仍是药物转运中的一个关键问题。然而除了构建主动靶向药物运转系统外，必须寻找一种能将药物高效介导进入细胞的方法，使更多的药物到达肿瘤部位后进入肿瘤细胞，提高胞内药物溶度，提高药物的跨膜转运效率，真正达到肿瘤靶向给药的目的。
聚乙烯亚胺(PEI)是一种水溶性聚胺，具有较低的生物毒性，其大分子链上拥有大量的氨基，常用作体内药物递送和基因转染的载体。叶酸(Folate，FA)是一种小分子量的文生素，具有结构稳定、无免疫原性等特点，其受体是一种糖蛋白，在肿瘤细胞膜表面高度表达，但在绝大多数正常组织中几乎不表达，而且叶酸与其受体结合能力强，由于这些原因，叶酸作为一种理想的肿瘤靶向载体，已在肿瘤药物输送、癌症免疫治疗等领域中得到广泛应用。
因此，设计、合成系列新型纳米微胶囊药物，尤其是生物相容性更好的聚乙烯亚胺，对于新药的研发具有重要意义。
1.2 国内外研究概况及存在的主要问题
1.3研究方案
1.3.1合成思路
1.合成聚乙烯亚胺涂层和转化为微胶囊
2.化学修饰
（1）对制备的PEI胶囊进行叶酸修饰；
（2）合成PEI-FA并对PEI-FA进行荧光染色，得到PEI-FA-Rhodamine。
3.叶酸-聚乙烯亚胺功能化胶囊进行修饰，制备靶向微胶囊，并对微胶囊进行形态、结构性能测试，确定微胶囊的适宜制备条件，使制备具有可重复性，且有完整形态。
4.在微胶囊上进行阿霉素的吸附和药物释放动力学的评估，研究药物负载量，确定载药适宜条件，并进行药物释放，确定不同环境条件的释放性能。
1.3.2项目实施方案
我们准备通过一种界面聚合反应，利用癸二酰氯作为交联剂，伴随着某种微乳剂形成一种水相薄膜。再用荧光素罗丹明标记。经叶酸修饰，利用叶酸分子中的羧基与Rhodamine-PEI中的活性基团发生酰胺反应，得到PEI-FA-Rhodamine。对产物胶囊进行修饰，制备靶向微胶囊，并对微胶囊进行形态、结构性能测试，通过PH等确定微胶囊的适宜制备条件，对微胶囊悬浮物进行大量透析，洗涤除去低分子量的反应产物和未反应的PEI,使制备具有可重复性，且有完整形态。然后在微胶囊上进行阿霉素的吸附和药物释放动力学的评估，通过洗涤、离心等操作除去未吸附的药物，根据紫外分光光度计计算其吸光度，进而得出动力学常数K以及最大吸收波长Amax。
1.4研究条件和可能存在的问题
已具备的研究基础：本研究项目的指导教师现从事叶酸修饰的药物微胶囊的合成及其反应性质的研究，有一定的工作基础，同时学校的实验条件也能够满足本课题需要。本研究项目的探索性较强，许多反应性质需要在研究过程中逐渐认识。在工作中，我们将根据研究结果，对研究内容和技术方案进行适当的调整，以确保完成本项目的研究目标。
拟解决的关键问题：本实验主要针对研究抗癌细胞的药物治疗，围绕着癌细胞的靶向性以及叶酸的特殊性，将药物高效介导进入细胞,使更多的药物到达肿瘤部位后进肿瘤细胞，提高药物的跨膜转运效率，真正达到肿瘤靶向给药的目的。