叶酸修饰NIPAM-PEI聚合物的研制及性能研究(4)
（2） 酶固定化
用PNIPAm固定化酶，能制备出对温度敏感的“溶解—非溶解”型固定化酶，易于分离，还能重复使用，酶的稳定性也会增加。通过将NIPAm与官能性的单体如甲基丙烯酸缩水甘油酯(GMA)或N—丙烯酰氧基琥珀酰亚胺(NASI)共聚，合成官能化的温敏聚合物，再通过偶合反应将该聚合物与酶合成为具有温度敏感性的生物大分子，从而实现酶的固定。
张传梅[7] 提出水凝胶载体材料优化模型，根据优化结果制备出了两种性能相异的载体材料，即聚丙烯酰胺/2 —甲基丙烯酸羟基乙酯和聚N—异丙基丙烯酰胺/—甲基丙烯酸羟基乙酯，并用其包埋α—胰凝乳蛋白酶，利用载体材料的温敏性实现了固定化酶活力的可控性及连续可调性，两种固定化酶经连续催化8次，其活力没有明显变化。
（3） 蛋白质吸附分离释放
利用PNIPAm的温敏性可制作具有温度敏感的多孔玻璃、功能膜及具有“开关”控制能力的温度敏感型超滤膜，常用于物料的分离。这类膜有许多优点：耗能少、易再生、操作条件要求不高，还不会使蛋白质中毒或失活。用热敏性水凝胶来分离物质时，只需在水凝胶的LCST附近反复升温或降温，使水凝胶反复选择性吸收和释放就可以达到分离目的。特别是用阴离子型温敏水凝胶PNIPAm分离不同分子量的化合物，分离效果明显，且被分离物的分子量越大分离效果越好。
金蔓蓉[8]等用PNIPAm凝胶对兰葡聚糖、牛血清蛋白、人体激素溶液以及碱性蛋白酶进行浓缩¬—萃取实验，具有良好的实用前景。Freltas 等用热敏性水凝胶分离出稀水溶液中的葡萄糖等物质，效率可达96%。王锦堂[9]研究了PNIPAm凝胶对蛋白质和酶的分离效率在LCST附近发生突跃，表现出良好的浓缩分离能力。
（4） 免疫分析
用PNIPAm作载体建立的免疫分析方法具有均相免疫分析速度快和异相免疫分析灵敏度高的特点。周平[10]等人将单克隆抗体与PNIPAm共价连接，建立了以可调节的高分子为载体的酶免疫分析方法，对血清样品中的HbsAg的检测，灵敏度高，效果好。朱庆枝[11]等人将PNIPAm和抗体偶连，用荧光素标记乙肝表面抗原抗体，建立了夹心型热敏相分离荧光免疫分析乙肝表面抗原的新方法，该方法具有分析速度快、免疫球蛋白对载体的非特异性吸附小等优点，在临床应用上有一定的价值。
（5） 医用高分子材料
PNIPAm可以与生物大分子偶合从而把温敏性传递给所合成的生物功能性材料，有人通过羟基化和接枝PNIPAm制备了热敏性聚苯乙烯盒，当环境温度低于32℃，盒内表面亲水，细胞快速生长；高于32℃则内表面疏水，细胞脱附。此外还有人把PNIPAm应用于细胞培养支持体材料：其方法是将PNIPAm和胶原的共轭产物涂在培养基上，在高于LCST时进行细胞培养，达到目的后将温度降低在LCST以下，使PNIPAm溶解，细胞则和培养基分离。
1.2.3 聚N—异丙基丙烯酰胺的研究状况
合成新型的PNIPAm共聚物其主要目的在于：①改变组分从而改变共聚物中亲水、疏水比例，改变LCST以扩大应用温度范围，研究结构与性能的关系。②扩大共聚物的应用功能，使其不仅具有温敏性，还具有如对PH、光等敏感的功能。
Chen 等[12]报道了一系列具有应激行为的PNIPAm共聚物与相对亲水共聚单体( 如丙烯酸、丙烯酰胺) 或相关的疏水共聚单体(如N—丙烯酸丁酰胺和N-叔丁基丙烯酰胺) 。得出共聚物中亲水性共聚单体含量的提高会使其LCST 升高；共聚物中酸性单元的增加，使聚(NIPAM-co-AA)的LCST具有pH依赖性；共聚物的LCST 在任何pH值下都比PNIPAm有所升高等结论。