最近几年，金纳米粒子已经广泛应用于各种各样的生物医学的应用当中，其中包括生物成像、（药物、高分子以及缩氨酸的）靶向传递、生物检测以及癌细胞的诊断和治疗[13-16]。金纳米粒子很容易合成，并且与不同的分子或者化学实体相结合，另外他们服从光学性质的变化[17-19]。金纳米粒子常常应用于药物输送，癌症成像，光动力疗法等，其具有显著的、较低的副作用[20,21]。本文通过设计合成新型的荧光金纳米簇，在其表面修饰生物分子，实现目标产物的检测[22,23]。利用人血清白蛋白(HSA)与胆红素之间的特异性作用，通过在金纳米粒子表面修饰人血清白蛋白，在优化检测体系条件下，进而识别生物体液中的胆红素，发展一种快速、简便、灵敏度高、选择性好的生物体液中胆红素的检测方法。以表面修饰人血清白蛋白的金纳米粒子为探针，通过荧光检测变化，通过对检测条件的优化，实现生物样品中胆红素含量的检测。此方法的优点为：灵敏度高、敏捷、准确可靠，可以实现实际样品的检测需要。

2。实验

2。1 试剂与仪器

试剂：四氯金酸(HAuCl4)，人血清白蛋白(HSA)，二次水，胆红素贮备液（新鲜配制10 mL 0。2 MNaOH溶液，用电子天平称取0。0058 g胆红素固体，完全溶解于NaOH溶液中，即可得到胆红素贮备液，其浓度为1 mM，另外，胆红素贮备液需要避光，包上锡箔纸即可，低温保存，1 h后，贮备液由亮红色变为暗褐色，需重新配制），NaOH固体，王水（HCl与HNO3的体积比为3∶1）文献综述

玻璃器皿：圆底烧瓶

电子仪器：电子天平，超声波清洗仪，79-1磁力加热搅拌器、水浴锅、荧光光谱仪

2。2 金纳米簇的合成

在每次实验之前，所有玻璃器皿都需要用王水（HCl与HNO3的体积比为3∶1）浸泡30 min，用二次水清洗干净后，超声波清洗仪超声清洗30 min，放入烘箱中，烘干。

先将500 µL 0。2 M HAuCl4和9500 µL二次水混合，放置于圆底烧瓶中，加入磁子，吸取10 mL 50 mg/mL人血清白蛋白(HSA)，加入其中，将圆底烧瓶置于水浴锅中，恒温至37 ℃，匀速搅拌2 min，之后，快速加入1 mL 1 M新鲜配制的NaOH溶液，计时。12 h后，取出，冷却至室温，将溶液转移到玻璃瓶中，在4 ℃环境下，避光贮存备用。溶液颜色从亮黄色变成浅棕色，最后变成深棕色。

2。3 胆红素贮备液的配制

新鲜配制10 mL 0。2 M NaOH溶液，用电子天平称取0。0058 g胆红素固体，完全溶解于NaOH溶液中，即可得到胆红素贮备液，其浓度为1 mM，另外，胆红素贮备液需要避光，包上锡箔纸即可，低温保存，1 h后，贮备液由亮红色变为暗褐色，需重新配制。

2。4 确定金纳米簇的最大激发波长(EX)

改变激发波长来确定金簇的最大发射波长位置。从图1中得出：EX＝350 nm时，金簇的荧光强度高且峰形较完整，即金簇的最大激发波长为350 nm。

图1。不同激发波长下金簇荧光强度及峰形的变化

2。5 金纳米簇稳定性的检测来,自,优.尔:论;文*网www.chuibin.com +QQ752018766-

配制稀释倍数为10的金纳米簇，加入二次水，每隔几天，检测荧光强度，其中最大激发波长(EX)为350 nm，最高峰的荧光强度。

3。结果与讨论

3。1 原理

胆红素能与人血清白蛋白(HSA)产生特异性结合，从而使得金纳米簇的荧光发生淬灭[24-26]。如图2所示，其中，HSA-AuNCs为人血清白蛋白修饰的金纳米团簇。