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前体和诱导子对桑悬浮细胞中次生物积累的影响(2)
2。2 实验方法 8
2。2。1 桑愈伤组织的诱导 8
2。2。1 悬浮培养体系的建立 8
2。3 桑悬浮细胞细胞生长曲线的测定 9
2。4 不同外源添加物对桑悬浮细胞次生物积累的影响 9
2。4。1 茉莉酸甲酯(MJ) 9
2。4。2 硝普钠(SNP) 9
2。4。3 冠菌素(COR) 9
2。4。4 苯丙氨酸 9
2。5 桑悬浮细胞中次生代谢产物含量的测定 10
2。5。1 黄酮含量的测定及标准曲线的绘制 10
2。5。1。1 黄酮标准曲线的绘制 10
2。5。1。2 黄酮的提取及测定 11
2。5。2 多糖含量的测定及标准曲线的绘制 11
2。5。2。1 多糖标准曲线的绘制 11
2。5。2。2 多糖的提取及测定 12
2。5。3 1-DNJ含量的测定及标准曲线的绘制 12
2。5。3。1 1-DNJ标准曲线的测定 12
2。5。3。2 1-DNJ的提取 13
2。5。3。3 衍生化过程 13
2。5。3。4 色谱条件 13
2。5。3。5 部分试剂的制备 14
第三章 实验结果与分析 15
3。1 桑悬浮细胞生长曲线的绘制 15
3。2 不同外源添加物对桑悬浮细胞生长的影响 15
3。2。1 茉莉酸甲酯(MJ)对细胞生长的影响 15
3。2。2 硝普钠(SNP)对细胞生长的影响 16
3。2。3冠菌素(COR)对细胞生长的影响 17
3。2。4苯丙氨酸对细胞生长的影响 17
3。3 不同外源添加物对桑悬浮细胞次生物积累的影响 18
3。3。1 茉莉酸甲酯(MJ)对次生物积累的影响 18
3。3。1。1 茉莉酸甲酯(MJ)对黄酮积累的影响 18
3。3。1。2 茉莉酸甲酯(MJ)对多糖积累的影响 19
3。3。1。3茉莉酸甲酯(MJ)对1-DNJ积累的影响 21
3。3。2 硝普钠(SNP)对次生物积累的影响 22
3。3。2。1 硝普钠(SNP)对黄酮积累的影响 22
3。3。2。2 硝普钠(SNP)对多糖积累的影响 23
3。3。2。3 硝普钠(SNP)对1-DNJ积累的影响 24
3。3。3 冠菌素(COR)对次生物积累的影响 25
3。3。3。1 冠菌素(COR)对黄酮积累的影响 25
3。3。3。2 冠菌素(COR)对多糖积累的影响 27
3。3。4 苯丙氨酸对次生物积累的影响 28
3。3。4。1 苯丙氨酸对黄酮积累的影响 28
3。3。4。2 苯丙氨酸对多糖积累的影响 29
第四章 结论 31
致谢 32
参考
文献
33
附录 37
第一章 绪论
1。1 桑的概述
桑树(Mulberry)为桑科桑属桑种植物,最早种植起源于我国,是人类历史文化中中华民族做出的贡献之一。桑树是一种栽种历史悠久的落叶乔木,桑树的栽培已有七千多年的历史,目前我国种植区域大部分分布于我国的中南部。我国收集和保存着世界上最多的桑树种类,共有15个桑种和3个变种[1,2]。桑树喜欢光照,能较好的适应生长所处的气候、土壤等环境,可以耐寒冻,但对水和湿度有较高的要求。能耐0。2 %以内的盐碱度。抗风,耐烟尘,抗有毒气体[3]。桑树全树皆有利用价值。桑叶主要作为家蚕的食物,桑皮用于造纸,桑果作为水果食用。研究表明桑树的叶、根、皮、嫩枝等具有药用价值[4-7]。
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