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亚硝酸盐还原酶发酵工艺研究(7)
式中:C-样品中亚硝酸盐含量
A- 吸光度
2.2.2 降解亚硝酸钠的测定
(1)培养基加入NaNO2
在5*200mLMRS培养基中,分别接入接种量为5%乳酸菌和不同终浓度的NaNO2,即50µg/mL、100µg/mL、150µg/mL、200µg/mL、250µg/mL,分别取样,以蒸馏水为对照,测定538nm下吸光度,37℃恒温培养箱培养18h后取出,取样测定538nm下吸光度。
(2)培养6h后加入NaNO2
在5*200mLMRS培养基中,分别接入接种量为5%乳酸菌,37℃恒温培养箱培养6h后取出,取样测定610nm下吸光度值,再分别加入不同终浓度的NaNO2,即50µg/mL、100µg/mL、150µg/mL、200µg/mL、250µg/mL,分别取样,以蒸馏水为对照,测定538nm下吸光度,继续放入37℃恒温培养箱培养18h后取出,取样测定538nm下吸光度。
2.2.3 培养基氮源的研究
(1)硝酸钠+酵母膏
在5*200mL硝酸钠10g+酵母膏5g培养基中,分别接入接种量为5%乳酸菌,37℃恒温培养箱培养6h后取出,取样测定610nm下吸光度值,再分别加入不同终浓度的NaNO2,即50µg/mL、100µg/mL、150µg/mL、200µg/mL、250µg/mL,分别取样,以蒸馏水为对照,测定538nm下吸光度,继续放入37℃恒温培养箱培养18h后取出,取样测定538nm下吸光度。
(2)硝酸钠+酵母
在5*200mL硝酸钠15g+酵母膏5g培养基中,分别接入接种量为5%乳酸菌,37℃恒温培养箱培养6h后取出,取样测定610nm下吸光度值,再分别加入不同终浓度的NaNO2,即50µg/mL、100µg/mL、150µg/mL、200µg/mL、250µg/mL,分别取样,以蒸馏水为对照,测定538nm下吸光度,继续放入37℃恒温培养箱培养18h后取出,取样测定538nm下吸光度。
(3)硫酸铵+酵母膏
在2*200mL硫酸铵10g+酵母膏5g培养基中,分别接入接种量为5%乳酸菌,37℃恒温培养箱培养6h后取出,取样测定610nm下吸光度值,再分别加入不同终浓度的NaNO2,即100µg/mL、200µg/mL,分别取样,以蒸馏水为对照,测定538nm下吸光度,继续放入37℃恒温培养箱培养18h后取出,取样测定538nm下吸光度。
(4)硫酸铵+酵母
在2*200mL硫酸铵15g+酵母膏5g培养基中,分别接入接种量为5%乳酸菌,37℃恒温培养箱培养6h后取出,取样测定610nm下吸光度值,再分别加入不同终浓度的NaNO2,即100µg/mL、220µg/mL,分别取样,以蒸馏水为对照,测定538nm下吸光度,继续放入37℃恒温培养箱培养18h后取出,取样测定538nm下吸光度。
2.2.4 培养基氮源的优化
(1)硝酸钠+不同质量酵母膏
在5*200mL瓶中,分别配制硝酸钠10g和不同质量酵母膏的培养基,酵母膏含量即1g、3g、5g、7g、9g,分别接入接种量为5%乳酸菌,37℃恒温培养箱培养6h后取出,取样测定610nm下吸光度值,再分别加入200µg/mL NaNO2,分别取样,以蒸馏水为对照,测定538nm下吸光度,继续放入37℃恒温培养箱培养18h后取出,取样测定538nm下吸光度。
(2)硫酸铵+不同质量酵母膏
在5*200mL瓶中,分别配制硫酸铵10g和不同质量酵母膏的培养基,酵母膏含量即1g、3g、5g、7g、9g,分别接入接种量为5%乳酸菌,37℃恒温培养箱培养6h后取出,取样测定610nm下吸光度值,再分别加入200µg/mL NaNO2,分别取样,以蒸馏水为对照,测定538nm下吸光度,继续放入37℃恒温培养箱培养18h后取出,取样测定538nm下吸光度。
2.2.5 不同加样时间对降亚硝酸钠的研究
(1)硝酸钠+酵母膏
在5*200mL硝酸钠10g+酵母膏7g培养基中,接入接种量为5%乳酸菌,37℃恒温培养箱分别培养1h、2h、4h、6h、8h后取出,取样测定610nm下吸光度值,再分别加入200µg/mL NaNO2,分别取样,以蒸馏水为对照,测定538nm下吸光度,继续放入37℃恒温培养箱培养23h后取出,取样测定538nm下吸光度。
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