饲料高铜对大肠杆菌blaCTX-M基因在大鼠肠道内转移的影响(3)
1 材料与方法
1.1 菌株来源
构建灌喂接合子菌株的blaCTX-M-1阳性供体菌为本实验室保存的大鼠粪源大肠杆菌分离株；受体菌为大肠埃希氏菌EC600（耐利福平），由香港理工大学深圳研究院惠赠质控大肠埃希氏菌株（ATCC 25922）（药敏试验用），购于广东微生物菌种保藏中心。
1.2 试剂和仪器
主要试剂：麦康凯琼脂（MacConkey Agar，MAC)，营养琼脂（Nutrient Agar, NA）,营养肉汤（Nutrient Broth，NB），均购于北京奥博星生物技术有限公司。LB琼脂（Laked blood Agar），LB肉汤（Laked blood Broth），MH琼脂（Mueller-Hinton Agar, MHA），MH肉汤（Mueller-Hinton Broth, MHB），均购买于青岛海博生物技术有限公司。盐酸头孢噻呋（艾呼克）购于西班牙海博莱生物大药厂。五水硫酸铜（CuSO4•5H2O）购于上海国药集团。萘啶酮酸、头孢噻呋钠、头孢噻肟钠、盐酸环丙沙星，均购于大连美仑生物技术有限公司。氨苄西林、氟苯尼考均购于南京龙斌生物科技有限公司。盐酸四环素、硫酸庆大霉素均购于生工生物（上海）股份有限公司。
主要仪器：微量移液器（Eppendorf，德国），高压灭菌锅（致微仪器有限公司），超净工作台，恒温震荡培养箱（Crystal，美国），隔水恒温培养箱（BINDER，德国），超微量分光光度计NanoDrop2000(Thermo scentific,美国)，PCR扩增仪（Applied biosystems，美国），电泳仪（北京市吹冰一仪器厂），凝胶成像分析系统（Bio-Rad，美国）。