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利用酵母双杂交技术筛选NLR1-V的互作蛋白(3)
本研究采用酵母双杂交技术筛选NLR1-V在小麦抗病通路中的互作蛋白,将含有抗病基因Pm21旳异位系材料92R137在白粉菌诱导处理后,分别取0h、12h、24h、48h不同时间段的样品提取RNA混合建库,构建高质量的三框cDNA文库,保证有效插入片段的正确表达率。分别将NLR1-V基因的CC、NBS、LRR三个结构域及NLR1-V基因全长构进常用的诱饵表达载体pGBTK7,以全长和不同的结构域分别作为钓饵筛选抗病通路下游的互作蛋白,注释互作基因和蛋白的功能,探究NLR1-V基因的抗性功能。
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