葛根素提取工艺条件的优化(2)
本研究采用超声波辅助提取法，通过改变提取的超声温度、料液比、乙醇浓度以及超声提取时间等因素考察葛根素的提取效果，再结合响应面法，从而优选出超声波法提取葛根素的最佳条件。
1 材料与方法
1.1材料与试剂
葛根，购于周口同和堂药店；
蒸馏水，周口师范学院自制；
葛根素标准品(CP)，国药集团化学制剂有限责任公司；
无水乙醇为分析纯。
1.2仪器设备
AL-204电子天平 梅特勒-托利多仪器（上海）有限公司；
HHS 6恒温水浴锅 巩义市予华仪器有限公司；
FW高速万能粉碎机 北京科伟永兴仪器有限公司；
SHB-Ⅲ循环水式真空泵 郑州欧卡仪器设备有限公司；
HWSI 2型电热恒温水浴锅 上海一恒科技有限公司；
KQ-2200型超声波清洗器 昆山市超声仪器有限公司；
UV-5100型紫外可见分光光度计 上海元析仪器有限公司。
1.3实验方法
1.3.1原料的预处理
挑选优质葛根，去除杂质，粉碎葛根，粉碎后过80目筛备用。
1.3.2标准曲线的绘制
用电子天平准确称取葛根素标准品3 mg，用70 %乙醇溶解并定容至50 mL，所得溶液作为标准品的母液[6]。使用移液枪精密吸取母液0 mL、0.5 mL、1.0 mL、1.5 mL、2.0 mL母液，分别置于10 mL容量瓶中，并用70 %的乙醇定容至10 mL，在250 nm波长下测定吸光度[7-8]，以吸光度(A)和质量浓度(C)进行回归分析，得回归方程：y=28.267x-0.0050(R2=0.9986)。（如图1所示）
图1 葛根素标准品的标准曲线
1.3.3葛根素的测定方法
准确称取定量的葛根粉，加入一定体积的乙醇浸泡处理10 min后进行超声波提取，提取后将所得的溶液进行抽滤，得到澄清的滤液，滤渣再次在同样的条件下超声处理，两次滤液混合并定容至50 mL备用，取60 uL提取液用一定体积分数的乙醇定容至10 mL，在250 nm波长下测定吸光度。根据标准曲线的回归方程，计算葛根素的提取率。
葛根素提取率的计算方法：
葛根素提取率% = 葛根素含量（g）/ 葛根质量（g）×100 %
1.3.4实验设计
固定超声波提取条件，通过单因素试验，研究超声时间、超声温度、料液比和乙醇浓度对葛根素提取率的影响，每个实验做三个重复；在单因素实验的基础上，通过方差分析，得出超声时间、超声温度和乙醇浓度三个单因素为影响提取率的关键因素（P<0.05），然后采用响应面试验确定出最佳的超声波提取条件。
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