细胞凋亡(apoptosis)又称为细胞程序性死亡(programmed cell death,PCD),是指在文持内环境稳定的情况下,由基因控制的细胞自主的有序的死亡[12],最早是1972年由Kerr教授根据形态学特征首先提出的[13]。他与细胞死亡有差别,是细胞主动发出的自杀行为。细胞凋亡在形态学上分为三个阶段:凋亡的起始,凋亡小体的形成,凋亡小体逐渐被细胞吞噬消化。国内外对细胞凋亡的研究方法有很多,比如通过ELISA检测法来研究细胞凋亡,通过ELISA检测凋亡细胞释放到细胞质中的核小体而确定细胞凋亡程度[14]。研究表明线粒体在细胞凋亡的时候膜电位降低[15],是细胞凋亡的早期事件。利用流式细胞术对细胞凋亡的检测也是比较好的方法,罗丹明染色法就是运用该技术来完成[16]。对细胞凋亡的研究很多都基于肿瘤细胞,而在食品方面研究甚少,因此为了有效控制食品腐败微生物并了解其作用机制,对黑曲霉细胞凋亡的研究就更具意义。
本实验主要以黑曲霉为实验原料,配制不同浓度的紫苏醛来处理黑曲霉,利用紫外分光光度计检测黑曲霉细胞膜甾醇含量,同时利用流式细胞仪检测不同浓度的紫苏醛对黑曲霉细胞周期和细胞凋亡的影响来初步研究紫苏醛对黑曲霉的抑菌机制。
1 材料与方法
1.1供试材料
1.1.1实验原料
紫苏醛:日本东京化成工业株式会社(TCI)购买所得
黑曲霉:接种于大学生命科学学院微生物学实验室
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