小麦条锈菌最佳生长条件的研究(2)
1．材料与方法
1.1实验材料的准备
发病小麦叶片取自周口农科所，在实验室进行分离、纯化并在PDA培养基上培养的条锈菌群。
1.2温度对条锈菌群生长的影响
在超净工作台上，在PDA培养基上已培养好的条锈菌菌丝用灭过菌的接种环挑取，然后把挑取的菌丝接种到第二个PDA培养基上，按此步骤连续接种五个平板，将这些已接种的平板分别倒置于已设定好不同温度梯度的恒温培养箱中进行菌种培养，根据实验方案，可以设定温度为5℃、10℃、20℃、30℃、35℃五个范围，连续培养4周后测量菌落直径和产生孢子数[10]。
1.3 pH对条锈菌生长的影响
用1mol/L的盐酸溶液和1mol/L的氢氧化钠溶液把PDA培养基调为4-10吹冰个不同的pH值，所有PDA培养基都要在无菌条件下接种培养好的条锈菌菌丝，把平板分别倒置于30℃恒温培养箱中培养，连续培养4周后测量菌落的直径和产孢数。
1.4 C、N源对条锈菌生长的影响
PDA培养基为基础培养基，含有各种菌丝生长所需要的养分、水分和适宜的酸碱条件。进行实验时分别使用柠檬酸、葡萄糖、甲醇、蜜蜂和可溶性淀粉为碳源物质；使用花生饼粉、尿素、硫酸铵、酵母粉、硝酸钾为氮源物质[11]。在无菌条件下分别将条锈菌菌丝接种于不同碳氮源组成的培养基上，倒置于30℃恒温培养箱中培养，连续培养4周后测量菌落的直径和产孢数。
1.5 光照对条锈菌生长的影响
在超净工作台无菌环境下将条锈菌菌丝接种在几个相同的PDA培养基上，将培养基分别置于距40瓦日光灯30cm处，对菌群进行持续黑暗12h、24h光照与黑暗交替、12h持续光照、设置温度30℃下培养，4周后测菌落直径及产孢量。