干秸秆乳酸发酵对蛋白质含量的影响 (2)
KDT(N)系列消化炉 苏州市天威仪器有限公司
KDT(N)-04定氮仪（半自动） 苏州市天威仪器有限公司
锥形瓶 150、250mL，容量瓶 100mL，消煮管 250mL， 烧杯，移液管（10mL） ，
胶头滴管， 容量瓶（1000mL 100mL）， 量筒（50mL），玻璃棒 ，
酸式滴定管 ，试剂瓶 。
1.2 实验方法
1.2.1 实验设计
本实验以干玉米秸秆为实验原料，选择光鲜亮丽、无明显霉变的全株干玉米秸秆，使用剪刀将玉米秸秆剪成1至2cm的秸秆碎片，在洁净的大白色搪瓷托盘中拌入适量的蒸馏水。拌入水量为用手紧握秸秆时不会有水滴落，秸秆整体掺拌均匀为宜。然后直接将拌匀的秸秆装入三个透明的塑料容器中（不添加任何菌种，直接利用秸秆本身所残留的菌种进行发酵）编号A、B、C, 在装瓶的过程中要求使用玻璃棒将秸秆压实，尽量除去容器内的空气，创造无氧发酵环境。接着将装有秸秆的三个塑料容器贴上标签，放入37摄氏度的恒温箱内发酵18 d。整个发酵过程必须保证厌氧环境，中途不得使空气进入发酵容器内。
1.2.2. 蛋白质含量测定
测定原理：采用凯氏定氮法测定样品中的含氮量，即在催化剂存在时，用硫酸破坏有机物，使含氮物质转化为硫酸铵。然后加入强碱进行蒸馏使氨逸出，用硼酸吸收后，再用盐酸溶液滴定,测出样品含氮量，将结果乘以换算系数6.25，进而计算出发酵后玉米秸秆中粗蛋白的含量。
样品消化：称取发酵后试样5g（精确度0.0001），放入消化管中，称取硫酸铜催化剂10g放入消化管并与试样混合均匀。再加入浓硫酸50mL后，样品焦化呈黑色，将消化管放入消化炉上，打开抽气三通进水（自来水）使抽气三通处于吸气状态，接通电源，打开对应控制开关，调节电位器使指示电压220V，开始消化。刚开始消化管内有液体飞溅并有大量的泡沫，待泡沫消失后，直至管内液体呈透明的蓝绿色，继续消化5h。消化后，自然冷却，冷却后将样品用蒸馏水定容至500mL容量瓶内，密封保存。
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