生物法制备天然烟用香料+文献综述(7)
（5） 酶解时间单因素
根据表2.1所列的酶解时间单因素，在其它四个因素：温度50℃、pH值4.0、料液比1:10、加酶量0.04%的条件下进行酶解时间单因素实验。精确称取样品1.000g，加入8mL缓冲液，并用缓冲液配制0.02%的纤文素酶液，酶液和样品置于50℃的恒温水浴锅内预热30min后，取酶液2mL加入样品后，置于50℃的恒温震荡水浴锅，分别计时酶解0.5h、1.0h、1.5h、2.0h、2.5h、3.0h，每个因素水平3组平行。水解液根据2.4.1所述的DNS法测定还原糖含量。
表2.1 纤文素酶单因素实验水平表
温度
/℃ pH值
料液比
/(g：mL) 加酶量/% 酶解时间
/h
30 2 1:5 0.02 0.5
40 3 1:10 0.04 1.0
50 4 1:15 0.06 1.5
60 5 1:20 0.08 2.0
70 6 1:25 0.10 2.5
1.30 3.0
2.3.2.3. 果胶酶单因素实验
（1） 温度单因素
根据表2.2所列的温度单因素，在其它四个因素：pH值3.0、料液比1:15、加酶量0.016%、酶解时间2.0h的条件下进行pH值单因素实验。精确称取样品1.000g，加入11mL缓冲液，并用缓冲液配制0.004%的果胶酶液，酶液和样品置于对应单因素温度的恒温水浴锅内预热30min后，取4mL酶液加入样品后，置于对应单因素温度的恒温震荡水浴锅，计时酶解2.0h，每个因素水平3组平行。水解液根据2.4.1所述的DNS法测定还原糖含量。
（2） pH值单因素
根据表2.2所列的pH值单因素，在其它四个因素：温度60℃、料液比1:15、加酶量0.016%、酶解时间2.0h的条件下进行pH值单因素实验。精确称取样品1.000g，分别加入pH值为2.0、3.0、4.0、5.0、6.0、7.0缓冲液11mL，并用对应pH值的缓冲液配制0.004%的果胶酶液，酶液和样品置于60℃的恒温水浴锅内预热30min后，取4mL酶液加入样品后，置于60℃的恒温震荡水浴锅，计时酶解2.0h，每个因素水平3组平行。水解液根据2.4.1所述的DNS法测定还原糖含量。
（3） 料液比单因素
根据表2.2所列的料液比单因素，在其它四个因素：温度60℃、pH值3.0、加酶量0.016%、酶解时间2.0h的条件下进行料液比单因素实验。精确称取样品1.000g，分别加入1mL、6mL、11mL、16mL、21mL、26mL缓冲液，并用缓冲液配制0.004%的果胶酶液，酶液和样品置于60℃的恒温水浴锅内预热30min后，取4mL酶液加入样品后，置于60℃的恒温震荡水浴锅，计时酶解1.0h，每个因素水平3组平行。水解液根据2.4.1所述的DNS法测定还原糖含量。
（4） 加酶量单因素
根据表2.2所列的加酶量单因素，在其它四个因素：温度60℃、pH值3.0、料液比1:15、酶解时间2.0h的条件下进行加酶量单因素实验。精确称取样品1.000g，分别加入15mL、14mL、13mL、12mL、11mL、10mL、9mL缓冲液，并用缓冲液配制0.004%的纤文素酶液，酶液和样品置于50℃的恒温水浴锅内预热30min后，分别取酶液0mL、1mL、2mL、3mL、4mL、5mL、6mL加入样品后，置于50℃的恒温震荡水浴锅，计时酶解1.0h，每个因素水平3组平行。水解液根据2.4.1所述的DNS法测定还原糖含量。
（5） 酶解时间单因素
根据表2.1所列的酶解时间单因素，在其它四个因素：温度60℃、pH值3.0、料液比1:15、加酶量0.016%的条件下进行酶解时间单因素实验。精确称取样品1.000g，加入11mL缓冲液，并用缓冲液配制0.004%的纤文素酶液，酶液和样品置于60℃的恒温水浴锅内预热30min后，取酶液4mL加入样品后，置于60℃的恒温震荡水浴锅，分别计时酶解0.5h、1.0h、1.5h、2.0h、2.5h、3.0h，每个因素水平3组平行。水解液根据2.4.1所述的DNS法测定还原糖含量。
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