2.2.2 血涂片的制作

以医用注射器参照本文2.2.1鲫鱼心脏采血法吸取鲫鱼血液，滴1滴在洁净载玻片右端，血滴不宜过大。另用一载玻片作为推片，将此推片末端斜置于第一块载玻片左源，并稍向右移，接触血滴，使血滴散布在2片玻片之间。将推片以30°～45°角度迅速向左方匀速推进，从而在玻片上留下薄而均匀的血膜，就成了血涂片。摇动涂有血膜的玻片，使之尽快干燥，避免细胞皱缩。晾干后的血涂片放入盛有甲醇的染色缸内，固定3～5min。最后将血涂片放在显微镜下观察各种血细胞的形态[6]。

2.2.3血细胞计数

用相应量程为5ml移液管分别吸取3.98ml的红细胞稀释液、0.38ml的白细胞稀释液和3.98ml的血小板稀释液并分别放入1～3号试管备用。

参照本文2.2.1鲫鱼断尾采血法用一次性毛细取血管分别三次准确吸取血液20ul，擦净管外粘附血液，将血液轻轻吹入三只称有稀释液的试管底部，并用上清液清洗取血管2～3次，轻轻摇动试管使血液与稀释液充分混匀。

将盖玻片放入计数板中央，用洁净玻璃棒占取少量已稀释混匀后的血细胞悬浮液，于盖玻片边缘一次性滴入计数室内，使之灌满，静置2～3min后，待细胞下沉后进行计数。计数血小板的血细胞悬液应静置15min。滴入计数室的细胞悬液不能过多或过少。在计数红细胞、白细胞和血小板时，可各使用一个计数室。来!自-优.尔,论:文+网www.chuibin.com

计数红细胞：把计数室中央的大方格置于视野内，用高倍镜计数中央大方格四角的和正中的5个中方格内的红细胞总数。

红细胞数/mm3=5个中方格内的红细胞总数×104

计数白细胞：在低倍镜下，计数计数室四角4个大方格中所有白细胞总数。

白细胞数/mm3=4个大方格内的白细胞总数×50

计数血小板：技术方法同红细胞。应将显微镜的聚光圈光圈缩小，使视野略暗，以便能看清血小板的折光。

血小板数/mm3=5个中方格内的红细胞总数×104