1.2.2甘薯幼苗的的培养与处理

（1）甘薯幼苗的培养:挑选大小合适、形态健康的徐薯28，清水洗净，并喷施0.1%多菌灵溶液，静置2小时后洗净，种植于含有泥炭、珍珠岩和原土的混合土壤环境中。通过适当浇水保持土壤湿润，并放置于28℃/26℃的温室中静置1月萌发茎蔓。文献综述

（2）实验材料获取：挑选长势一致的甘薯苗33个，从茎一定部位斜着剪下，保证剪取部分大体一致。

1.2.3配制试剂

配置含有不同浓度的ATP/ADP/PPADS的处理液（用1/8霍格兰营养液配置），用7ml离心管分装后得到以下处理组： 

对照：1/8霍格兰营养液

ATP浓度：0.01 mM  0.1 mM  1 mM  5 mM 

ADP浓度：0.01 mM  0.1 mM  1 mM  5 mM

PPADS浓度：50 μM   100 μM

配制步骤：首先配置霍格兰营养液，取一升的超纯水，用移液枪分别向其中加入625 ml的Fe、Mg、Ca、Ka、An溶液，再加入125 ml的微量元素，用玻璃棒搅拌均匀后，用酸度计将其PH值调试到5.8-6.0的范围（如果PH小于5.8，加碱溶液，先从低浓度的加，要逐滴加入，搅拌均匀后观察PH值；如果PH偏高用酸中和，直至调试到这个范围中）。霍格兰营养液配好之后，用100 ml的量筒量取100 ml的该溶液4组，分别放置到四个小烧杯中，编号1-4，分别对应0.01 mM、0.1 mM、1 mM、5 mM四个浓度，先用移液器枪分别从1、2号两个烧杯中移出1 ml和2 ml的溶液。秤取0.0551 g和0.27555 g的ATP分别放入3号和4号烧杯中，用玻璃棒搅拌均匀，然后分别取3、4号两个烧杯中的溶液1 ml和2 ml，加入到1、2号两个烧杯中，搅拌均匀。用同样的方法配制ADP的四个处理组，只是秤取ADP 0.0427 g和0.2136 g之后再重复上面步骤。配制PPADS的时候，先用二甲亚砜溶解，配成母液，然后分别稀释到50 μM和100 μM两个浓度。

每组需要3个重复，共需要33株甘薯苗。

1.2.4实验操作

取33个离心管，分别编号并注明浓度与试剂的种类，用锡箔纸将离心管包裹住避光，分别向33个离心管中加入配置好的溶液置离心管30 ml的刻度线，将甘薯茎基部插入配置好的处理液中，保证插入处理液中茎的长度一致，不超过一厘米，并且要使根的生长点保持在20-25刻度线之间。甘薯苗用一定方式固定。实验过程中每天统计完不定根数据之后更换处理液（添加抑制剂PPADS的实验组不需要更换），避免药品降解造成对实验准确性的影响。 来*自-优=尔,论:文+网www.chuibin.com

1.2.5植物生根指标的测定

从甘薯茎基部插入处理液起每24小时拍照，测定每株甘薯茎基部不定根数目和每株甘薯茎基部不定根的平均长度。甘薯茎基部培养7天后，进行生根指标统计。每株甘薯苗平均不定根长度统计方式为：一株甘薯苗茎基部不定根总长度/不定根数目。不定根数目统计以肉眼可见不定根为准。