氯化钠 0。1g 碳酸钙 0。5g

酵母膏 0。5g 去离子水 1000mL

2。1。4其他试剂

Salkowski显色剂：将150mL浓H2SO4缓慢倒入 250mLddH2O中，边加边使用玻璃棒搅拌，待H2SO4溶液冷却至室温后再加入7。5mL0。5M的FeCl3∙6H2O溶液，即配得显色剂[15]。（该显色剂需避光保存）来*自-优=尔,论:文+网www.chuibin.com

2。2实验方法

2。2。1内生细菌的活化

（1）取出保藏于超低温冰箱的供试菌株保种管，于超净工作台内使用已灭过菌的竹签挑取少量冻结的菌体，接种至LB液体培养基中（30mL每瓶），于37℃摇床中培养过夜；

（2）锥形瓶中出现菌体浑浊后，取200μL菌体悬浮液涂布至LB固体培养基，37℃恒温培养箱倒置培养10±2h，直至长出单克隆菌落。

2。2。2内生细菌固氮能力检测

将供试菌株以点接的形式转接至无氮培养基上（每个平板可划线分区，接种数株菌），于37℃电热恒温培养箱中培养3-4d，观察其生长状况，并进行转接，转接5次，若菌体仍可以正常生长，则结果视为阳性，反之，则为阴性。

2。2。3内生细菌解磷能力检测

2。2。3。1 解无机磷能力测定

将供试菌株以点接的形式转接至无机磷培养基上（每个平板可划线分区，接种数株菌），于37℃电热恒温培养箱中倒置培养3-4d，观察菌体生长状况以及菌落周围是否产生清晰的透明圈，若有产生，则结果视为阳性，反之，则结果视为阴性[16]。