卡那霉素 30ug ≤13 14-17 ≥18 哌拉西林 100ug ≤17 18-20 ≥21

庆大霉素 10ug ≤12 13-14 ≥15 羧苄西林 100ug ≤19 20-22 ≥23

丁胺卡那 30ug ≤14 15-16 ≥17 氨苄西林 10ug ≤11 12-14 ≥15

头孢哌酮 75ug ≤15 16-20 ≥21 苯唑西林 1ug ≤10 11-12 ≥13

头孢曲松 30ug ≤13 14-20 ≥21 青霉素 10U ≤28 —— ≥29

    （参照标准为WS/T125-1999）

用灭菌棉拭子将菌液涂布于MH培养基中，将药敏纸片等距离贴到培养基表面，置于37℃培养箱中过夜培养，观察有无抑菌圈，并用游标卡尺测量抑菌圈直径大小，单位取mm。

注意：来`自+优-尔^论:文,网www.chuibin.com +QQ752018766-

1、药敏纸片在使用前2h从冰箱中取出，暖至室温再打开，以避免出现冷凝水。

2、用灭菌棉拭子蘸取菌液时，需在管壁上端旋转挤压几次，避免蘸取过多菌液。

3、MH培养基使用前应烘干。

4、药敏纸片需贴均匀，纸片与纸片的中心距离不应小于24mm。

5、纸片贴好后15min内，需把平皿倒置于35℃恒温培养箱中培养。16-18h后测量结果。               

2。2。3细菌染色体DNA的提取

将菌液10000rpm×5min离心，弃去液体，用100微升无菌超纯水悬浮沉淀，沸水浴20min，12000rpm×10min离心，取上清作PCR扩增模板。

2。2。4耐药基因的扩增

    参照Genbank中相关基因的序列自行设计，见表（2-2），由北京赛百盛基因技术有限公司合成。

表2-2 引物序列及目标片段长度

抗生素种类 抗性基因 引物序列 片段大小（bp）

氨基糖苷

类 aadA1 Ttgatttgctggttacg

atgacgggctgatactg 529

strA Cttgaatcgaactaata

tcaaccccaagtcagagg 806

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