研究植物细胞、组织和器官以及控制其生长发育的技术，是植物进行无性系快速繁殖、某些药物及次生产物的工业化生产以及获得无病毒(包括其它病原)植物的有效手段之一。

1。2  玉米愈伤组织培养和诱导

玉米是一种重要的粮食作物和饲料作物，其组织培养及遗传转化的研究一直是热点和难点。组织培养在克服玉米幼胚的衰败和突变体筛选方面有着重要的意义，在远缘玉米杂交中，由于生殖隔离和不亲和性，杂交玉米的胚乳往往会不正常发育，从而使胚芽早期败育，而组织培养则完美的解决了这一个问题。文献综述

此外，组织培养还能诱导细胞和分化植株发生染色体变异，在培养过程中，这种突变很有可能导致“意外”的有用突变，经过抗性筛选可筛选出具有特殊抗性的玉米幼胚突变体。同时，组织培养不受时间限制，通过人为的条件控制，避免了外界自然环境的干扰，缩短生长周期，对于玉米的大规模生产具有特殊的意义。

目前，在玉米遗传转化工作中，最常用的受体是胚性悬浮细胞、原生质体以及Ⅱ型愈伤组织。愈伤组织分为类型Ⅰ和类型Ⅱ，前者呈现结构坚硬，致密，生长缓慢；后者高度松散，带有体细胞胚，生长迅速，但只有由Ⅱ型愈伤组织制备的悬浮细胞以及原生质体才具再生能力。因此，通过组织培养筛选出Ⅱ型愈伤组织便成为玉米组培筛选极关键的一环。

2  材料与方法

2。1  实验材料、试剂、培养基

2。1。1  实验材料

选用的玉米胚为成单18基因型的玉米幼胚，玉米试验材料每年4月初至6月中旬播于本所农场内，每隔10d播1次，7月-9月进行人工授粉，作好记录。

所选用的农杆菌菌株为LBA4404。MS和N6 培养基为：MS1（MS+CH 500mg/L+6-BA 1。5mg/L+2，4-D 3mg/L）、MS2（MS1+AgNO3 5mg/L）、N61（N6+CH 500mg/L+6-BA 1。5mg/L+2，4-D 3mg/L）、N62（N61+AgNO3 5mg/L）。来-自~优+尔=论.文,网www.chuibin.com +QQ752018766-

2。1。2  实验试剂

将储存在-70℃冰箱的原始农杆菌菌液，在含有Timentin(特美汀)抗生素的YEB平板上进行画线培养，28℃黑暗培2d。挑取平板上的单菌落加人含有Timentin(特美汀)抗生素的5mL YEB液体培养基中，在220 r／min，28℃的恒温摇床上振荡培养至对数生长期。将菌体按1：50的比例进行二次活化，活化好的菌液离心后用MSB液体重悬菌体，作为共培养液备用。