1。2 实验步骤

1。2。1 主要试剂与培养基的配制

PDB培养基：将马铃薯去皮后冲洗干净，切成小段，称取200 g放置锅中，并加入约1500 ml的蒸馏水，于电磁炉上煮烂。用四层纱布过滤出1000 ml滤液置瓷缸中，并加入20 g葡萄糖，加热搅拌，直至葡萄糖完全溶解，冷却后分装于锥形瓶中，高压灭菌。来-自~优+尔=论.文,网www.chuibin.com +QQ752018766-

PDA培养基：将马铃薯去皮后冲洗干净，切成小段，称取200 g放置锅中，并加入约1500 ml的蒸馏水，于电磁炉上煮烂。用四层纱布过滤出1000 ml滤液置瓷缸中，并加入20 g葡萄糖和15 ~ 20 g琼脂，加热搅拌，直至葡萄糖和琼脂完全溶解，立刻分装于锥形瓶中，高压灭菌。

75%乙醇：用量筒分别量取无水乙醇75 ml，蒸馏水25 ml，置烧杯中混匀。

0。1%吐温-80：用移液器缓慢吸取300 μl吐温-80到300 ml的超纯水中，超声震荡至溶液澄清。

A液（0。2 mol/l Na2HPO4溶液）：称取71。64 g的Na2HPO4·12H2O（Mr = 358。22），溶解，稀释至1000 ml。

B液（0。2 mol/l NaH2PO4溶液）：称取31。21 g的NaH2PO4·2H2O（Mr = 156。03）,溶解，稀释至1000 ml。

PH 7。4 PBS 缓冲液：量取81 ml的A液与19 ml的B液，用超纯水定容至200 ml，混匀。

无菌缓冲液：0。148 g EDTA，10 ml PH 7。5 Tris，20 ml PMSF和170 ml无菌水，混匀。