Keywords: l-deoxynojirimycin (DNJ); Bacillus; screening; identification;

第一章 绪论 1

1。1  引言 1

1。2 DNJ 的概述 1

1。3 DNJ 的来源 2

1。4 DNJ 的作用 2

1。4。1  治疗糖尿病 2

1。4。2  抗肿瘤作用 3

1。4。3  抗病毒作用 3

1。4。4  生产麦芽糖 3

1。5  微生物发酵 4

1。5。1  含义 4

1。5。2  发酵培养基组份 4

1。5。3 发酵条件 4

1。6 DNJ 的研究进展 5

1。6。1 DNJ 的提取 5

1。6。2  分离纯化 5

1。6。3 DNJ 的检测 5

1。7  实验主要内容 7

1。7。1  主要实验内容 7

1。7。2  技术方案 7

第二章 实验材料与方法 8

2。1  实验药品与仪器 8

2。1。1  实验药品 8

2。1。2  实验器材 9

2。2  产 DNJ 菌株的初筛 9

2。2。1  培养基 9

2。2。2  实验样品 10

2。2。3  菌株的培养及分离 10

2。2。4  菌株的初筛 10

2。3  产 DNJ 菌株的复筛 12

2。3。1  制作 DNJ 标液 12

2。3。2 DNJ 标准曲线的制作 12

2。3。3  发酵液衍生化预处理 12

2。3。4  发酵液中 DNJ 的衍生化处理 12

2。3。5  色谱条件 13

2。4  使用单因素法确定菌株产 DNJ 的最佳条件 13

2。4。1  发酵温度 13

2。4。2  发酵时间 13

2。4。3 发酵初始 pH 13

2。4。4  摇床转速 13

2。5  使用优化后的发酵条件二次发酵对菌株进行验证 14

2。6  菌株生理生化鉴定 14

2。6。1 菌株形态结构 14

2。6。2 生长曲线 15

2。7 菌株基因组的提取并进行 PCR 扩增 15

2。7。1 试剂 15

2。7。2  菌株基因组的提取 16

2。7。3 电泳检测 16

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