灵芝不同生长阶段糖类物质含量分析(3)
2. 实验内容
2.1 实验试剂与仪器
2.1.1 实验试剂
蒸馏水、无水乙醇、超纯水、5％苯酚溶液、0.1mg/ml葡萄糖溶液、浓硫酸等。
2.1.2 实验仪器
仪器名称 生产厂家
Dionex ICS 2500高效阴离子色谱仪
CarboPac MA1阴离子交换柱
脉冲安倍检测器 美国Dionex公司
美国Dionex公司
美国Dionex公司
冷冻干燥机 美国Thermo Savant公司
移液枪
离心机
BP3100S电子天平
Milli-Q超纯水设备
Synergy HT 多功能酶标仪
96孔培养板 德国Eppendorf公司
德国Eppendorf公司
德国Sartorius公司
美国ULTRA公司
BIO-TEK公司
COSTAR公司
2.2 实验方法
2.2.1 栽培和取样方法
（1） 菌包栽培培养基配制
78%木屑，13%麸皮，7%玉米粉，1%蔗糖，1%石膏粉，加水量60%。装袋后加塑料瓶盖制成菌包，120℃灭菌2小时。
培养瓶栽培培养基配制：78%木屑，10%麸皮，10%玉米芯，1%硫酸钾，1%碳酸钙，加水量60%。每瓶湿重50g装入培养瓶，用含滤纸塑料薄膜作为瓶塞封瓶，120℃灭菌1小时。
（2） 栽培方法
冷却后的培养基中接入斜面固体培养菌种，接种量为每袋1/3支斜面。培养条件为温度，湿度，培养时间60天时为菌丝长满时期，以剪去掉塑料瓶盖及顶部部分菌丝体的方式给予刺激，后约15天后开始形成原基，形状为针刺状的菇蕾，之后约6-7天时间形成初期的子实体，此时的菇盖较小；之后约5-6天时间形成成熟子实体，菇盖明显增大。
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