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从鸡蛋蛋黄中提取分离唾液酸糖肽研究(2)
所有多生物表面覆盖着反映不同细胞种类和状态的糖链,它们不仅在细胞与细胞之间,细胞与基底之间的识别事件起着重要的作用,而且与众多的生物现象有关,如细胞发育、分化、形态、肿瘤转移、微生物感染等,聚糖作为第三类生物信息大分子,对于文持多细胞动物个体十分重要,因此,20世纪末有几个糖生物学家同时提出了“糖组”的概念。糖组学主要解决4个方面问题:a.什么基因编码糖蛋白,即基因信息;b.可能糖基化位点中实际被糖基化的位点,即糖基化位点信息;c.聚糖结构,即结构信息;d.糖基化功能,即功能信息。
相对于基因组和蛋白质组,糖组具有以下特点和重要性.a.所有机体的所有细胞都被丰富的糖链覆盖,这种构成反映了细胞不同种类和状态.b.自然界糖种类较多,但聚糖的组成糖种类仅有十几种,常见的只有葡萄糖(Glu)、乙酰葡萄糖胺(GlcNAc)、甘露糖(Man)、半乳糖(Gal),乙酰半乳糖按(GalNAc),木糖(Xyl),阿拉伯糖(Ara)等.c.聚糖如此高的复杂性取决于多变的链连接方式和分支方式(其他大生物分子没有).聚糖的结构多样性在生物信息上比核酸和蛋白质有更高的影响力,对于生物情报分子是必须的。
蛋白质和核酸是氨基酸和核苷酸的直链聚合物,而糖类具有复杂的分支和多样的链连接.糖蛋白石油多肽和糖通过糖肽键连接而成的,糖蛋白多肽链的合成与非糖基化蛋白质基本相同,仅在多肽链合成的同时或之后伴有肽链的糖基化作用。在真核生物中有3中糖基化,即N-糖基化,O-糖基化,GPI-糖基磷脂酰肌醇锚区,而动物糖蛋白的糖基化主要发生在肽链上的天冬酰胺(Asn)、丝氨酸(Ser)、苏氨酸(Thr)、羟赖氨酸(Hyl)、羟脯氨酸(Hyp)残基上。
糖蛋白的糖链可以是直链或支链,糖基数目一般在1~15个,在生物体内糖链的结构模式还是有一定的规律性,其中N-糖基化有三甘露糖核心结构,根据其他糖与之连接的情况分为高甘露糖型、复杂型和混合型三类。
糖组学研究技术的关键在于糖蛋白的分离和富集。目前,糖蛋白和聚糖分离策略主要有2条途径:一是经典的凝集素亲个色谱“糖捕获”方法,另一种是二文电泳结合特殊染色的分离方法。近年来有发展了快捷易于
自动化
的多文液相色谱分离多糖技术。
1.2 课题的目的
糖蛋白[3]是指有寡糖结构与蛋白链中某些特殊氨基酸残基侧链上的羟基或羧基以共价键连接的一类蛋白质,在生命活动中扮演着重要的角色,如细胞信号识别、神经调控、细胞间的信息传达及免疫调节等,同时糖蛋白类及激素类化合物中糖集团的生物功能长期未能得到阐明,对此存在诸多假设,这些假设促使人们开始寻找合成的糖结合体来进行研究,因此引起了人们的广泛关注。糖蛋白中的糖苷一般由几个到几十个单糖通过糖苷键组成,根据糖肽键的不同分为两大类:N-连接的糖蛋白和O-连接的糖蛋白。N-连接糖蛋白:是N-乙酰氨基葡萄糖(GIcNAc)的异头碳与Asn的γ位酰胺N原子之间形成的共价键,依据核心向外延伸的差异又可分为复杂型、高甘露糖型、杂合型三种O-连接糖蛋白:O-糖肽键是由糖的异头碳与Thr、Ser、4一羟脯氨酸、5一羟赖氨酸等氨基酸的羟基缩水成键。功能:糖链-文持糖蛋白结构稳定,抵抗蛋白酶水解及参与多肽链在内质网的折叠启动,具有开关和调谐功能、激素功能、胞内转运功能、保护与促进物质吸收功能。蛋白质:糖蛋白中的蛋白质是其生理功能的主要承担者,而糖链则对蛋白质的功能起修饰作用。
糖蛋白与很多疾病如感染、肿瘤、心血管病、肝病、肾病、糖尿病以及某些遗传性疾病等的发生、发展有关。再者,细胞表面的糖蛋白及糖脂可“脱落”到周围环境或进入血循环,它们可以作为异常的标志为临床诊断提供信息;患某些疾病时体液中的糖蛋白亦常有特异性或强或弱的改变,这可有助于诊断或预后的判断。糖蛋白还日益介入治疗。例如,针对特定细胞表面特异性糖结构的抗体可作为导向治疗药物的定向载体。利用糖类(单糖、寡糖或糖肽)抗感染及抗肿瘤转移也已崭露头角。
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