待提取的铁蛋白液足够多的量时，一部分进行铁蛋白电泳纯度分析和氨基酸组成测定。另一部分则用冷冻干燥机进行冷冻，干燥获得粗铁蛋白固体粉末，待加工功能试验需用。

2.3.2大豆铁蛋白的纯度分析

参照Laemmli方法（1970）对提取的粗铁蛋白质溶液进行Native和SDS-PAGE 聚丙烯酰胺凝胶电泳[9~10]。具体方法：

Native-PAGE凝胶浓度为4-20%梯度胶，电泳缓冲液为Tris-HCl（0.025 M, pH 8.3）；样品缓冲溶液中含有25%甘油，12.5% 0.5 M Tris –HCl pH 6.8及1%溴酚兰，每孔点样15 μL，Marker 6 μL，在4 ℃、25 V条件下进行电泳13 h。

SDS-PAGE凝胶浓度为15%，电泳缓冲液为Tris-HCl（0.025 M, pH 8.3, 10% SDS）；样品缓冲溶液中含有25%甘油，12.5% 0.5 M Tris –HCl pH 6.8，2 % SDS，1%溴酚兰和5%β-巯基乙醇，每孔点样15 μL，Marker 6 μL，充分混合后在95℃的水浴中保持5 min，然后在常温下下进行电泳。

胶板大小为80 mm（W）×73 mm（H）× 0.75 mm（T）。电泳结束后用考马斯亮蓝（CBB）R-250 染色法进行染色（朱厚础，1999）。

Native-PAGE电泳蛋白质Marker为：甲状腺球蛋白（669 kDa）； 马脾铁蛋白（440 kDa）；过氧化氢酶（232 kDa）；乳酸脱氢酶（140 kDa）；牛血清清蛋白（66 kDa）。

SDS-PAGE电泳蛋白质Marker为：磷酸化酶B（97.4 kDa）；牛血清清蛋白（66.2 kDa）；兔肌动蛋白（43 kDa）；牛碳酸酐酶（31 kDa）；胰酶抑制剂（20.1 kDa）；溶菌酶（14.4 kDa）