药食两用中药菊花中多糖的快速质量评价方法学研究(4)
上述结果表明，采用NIRS技术结合化学计量学用于中药材组分含量测定的研究方法一直是中药分析领域的热点，在被测组分的质量分数较高的情况下（大于0.1%），能够达到较好的精度。但涉及到特征变量提取、光谱预处理方法研究较少，因此，本实验将NIRS和光谱变量筛选方法结合，为中药材指标性成分快速检测方法的发展提供支撑。
综上所述，本研究将以菊花为研究载体，以菊花中多糖为研究指标，借助NIR法对其快速质量评价方法进行研究，从而为NIRS快速检测中药材提供实验依据和科学支持，为进一步利用NIRS技术开展现场速检奠定基础，本研究结果对道地药材品质评价具有重要意义。
第二章 材料与方法
1 材料
1.1 药品与试剂
D-无水葡萄糖（批号：110833-201205）（纯度均大于98%）购自中国食品药品检定研究院源`自,吹冰`文.论"文'网[www.chuibin.com。菊花药材购自全国。80％乙醇溶液、苯酚、硫酸、蒸馏水，试剂均为分析纯。
1.2 仪器
250 mL容量瓶、25 mL具塞试管、各规格移液管、比色皿、UV-2401紫外-可见分光光度计（日本 岛津），BP211D型电子天平（美国Sartorius），Antaris傅立叶变换近红外光谱仪（美国Thermo Nicolet）配有InGaAs检测器、积分球漫反射采样系统、Result 操作软件、TQ Analyst V6 光谱分析软件等。
2 方法
2.1硫酸-苯酚法测定菊花中多糖的含量
2.1.1溶液的制备
（1）对照品溶液的制备
取于105℃干燥至恒重的葡萄糖对照品0.01g，精密称定，加蒸馏水溶解，用100 mL容量瓶定容，即得对照品储备液。
吸取上述对照品储备液适量，置于具塞试管中。加蒸馏水使体积为2.0 mL后，再加入苯酚液1.0 mL，摇匀后迅速滴加浓硫酸5.0 mL，摇匀后放置5min。置沸水浴中加热15min，取出，然后冷却至室温或置于冰盒中快速降温至室温。空白对照组以2 mL蒸馏水加苯酚和浓硫酸，同上操作。于490nm处测定吸光度。
（2）样品溶液的制备
取菊花药材粉末（40目）0.4g，精密称定，置于圆底烧瓶中，加入80%乙醇溶液200 mL，回流提取1h，趁热过滤，残渣用80%热乙醇溶液洗涤（约10 mL ，10次），残渣连同滤纸置于烧瓶中。加提前加热的热蒸馏水100 mL，加热提取1h，趁热过滤，残渣再取热蒸馏水充分洗涤（约10 mL /次，10次），洗液一同并入滤液，冷却后用蒸馏水，在250 mL容量瓶定容，即得样品溶液储备液。
精密吸取上述样品溶液储备液 1.0 mL，置于具塞试管中，加蒸馏水使体积为2.0 mL，再加苯酚液1.0 mL，摇匀，迅速滴加硫酸5.0 mL，摇匀后放置5min。置沸水浴中加热15min，取出，冷却至室温，空白对照组为蒸馏水2 mL加苯酚和硫酸，同上操作，于490nm处测定吸光度。