CZ130302新型猪链球菌株ChzM-TolA基因缺失株的构建(3)
1．2 细胞株及培养条件
人类喉癌上皮细胞（Hep-2 cell）、小鼠微脑血管内皮细胞（bEnd.3 cell）均购买于美国模式菌种收集中心(American typical culture collection ATCC)，由实验室冻存。
1．3 实验动物及饲养方法
无特定病原体（SPF级）BALB/c小鼠，购买于江苏扬州大学实验动物中心，共24只，5~6 周龄，雌性，体重 18~22g，随机分成三组饲养、每日换水换料、保持清洁。
1．4 试剂与培养基
细菌 DNA 提取试剂盒购买于天根生化科技公司；质粒抽提试剂盒、PrimeStar 高保真2×Mix、DNA2000marker、10×Loading DNA Buffer、RNaseA均购买于TakaRa 大连宝生物工程有限公司；2 × Taq Master Mix购自Vazyme南京诺唯赞生物科技公司；胶回收抽提试剂盒购买于美国OMEGA公司；信号肽由上海强耀生物科技有限公司合成；引物由擎科生物有限公司合成。
无水乙醇、甘油、冰乙酸购买于国药集团化学试剂有限公司；Agar、Yeast extract、Tryptone购买于Oxoid公司；THB培养基购买于美国BD公司；无菌绵羊血购买于江苏省疾控中心；壮观霉素、胰酶、溶菌酶、蛋白酶K均购买于南京鼎国生物技术公司；Na2HPO4、KH2PO4、NaCl和KCl购买于西陇化工股份有限公司；细胞培养液购买于Gibco细胞培养序列产品。Tris、Na2-EDTA、Triton购买于南京鼎思生物技术有限公司、Agarose购买自Sigma公司。
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