加米霉素对猪呼吸道常见病原菌的体外抗菌活性研究(2)
引起猪呼吸系统疾病的病原菌非常多[1-2]，其中病毒病原有猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、圆环病毒2 型(PCV-2)、伪狂犬病病毒(PRV)、流感病毒(SIV)、猪瘟病毒(HCV)等。细菌病原有支气管波氏杆菌、放线杆菌、多杀性巴氏杆菌、副猪嗜血杆菌、链球菌等。此外还有支原体、附红细胞体及弓形体等。猪群受到上述病原的感染后，会使得猪的机体免疫力下降，给其它病原体的侵入提供了条件。同时也易产生十分严重的继发性感染，使呼吸系统疾病的病情更严重,导致猪群死亡率升高[3]。
抗生素在防治此类疾病中发挥了重要作用，如青霉素类、头饱菌素类，氨基糖苷类，大环内酯类、四环素类、氯霉素类、林可霉素类、氟喹喏酮类等[4-5]，其中以大环内酯类、氯霉素类应用最多。本文以目前较新的兽用大环内酯类药物加米霉素、替米考星为对象，测定其对猪呼吸道常见致病细菌的最小抑菌浓度（MIC）。抗生素最低抑菌浓度(MIC)测定对保证严重感染的疗效具有重要价值,尤其在使用潜在毒性抗生素或对轻度耐药病原菌作抗菌治疗时，MIC结果是拟定合理抗菌方案的主要依据[6]。
加米霉素（Gamithromycin）属氮杂内酯类抗生素，是由法国梅里亚国际有限公司（MerialLtd.）研发的动物专用大环内酯类半合成抗生素，为已有商品名Zactran的注射液（规格：150 mg/m L），分别于2007年、2010年和2011年被欧洲药品局（European medicines agency,EMA）、加拿大保健产品与食品管理局(health products and branch,HPFB）和美国食品与药品管理局（food anddrug administration,FDA）批准上市销售[7-8]，主要用于预防和治疗由溶血性曼氏杆菌、巴氏杆菌和睡眠嗜组织菌等病原菌引起的非泌乳牛的呼吸系统疾病[9]。2014年7月，EMA增加了加米霉素在猪肝脏、肾脏、肌肉、皮肤+脂肪中的的最大残留限量（MRL）[10]。2016年2月，欧盟批准Zactran用于治疗由胸膜肺炎放线菌、多杀巴氏杆菌、副猪嗜血杆菌引起的猪呼吸系统疾病（SRD）。
加米霉素的抗菌作用机理与其他大环内酯类药物相同，主要是与敏感菌的核蛋白体 50s亚基结合，使肽链的合成和延长受阻，从而抑制细菌蛋白质的合成。加米霉素的结构中含有7α位氮杂环，因这一化学结构使得加米霉素在生理 p H 条件下可以被快速吸收，并能在靶组织肺脏中长时间的文持有效浓度。此外，加米霉素还具有单次给药、吸收快、分布广、生物利用度高、低残留、安全高效等优点，故在畜禽生产养殖中具有非常广阔的应用前景[11-12]。
Mitchell等[13]研究了加米霉素对引起牛传染性胸膜肺炎（CBPP）的丝状支原体丝状亚种SC生物型（MmmSC）在人工培养基和成年牛血清中的体外抗菌效应动力学，与此同时测定了两种早期的大环内酯类药物：替米考星与泰乐菌素的抗菌效应，从而对加米霉素和两者之间的差别进行比较。结果表明，在在人工培养基中的MICs值明显高于在成年牛血清中测得的MICs值。细菌初始接种量为106CFU/mL时，加米霉素、泰乐菌素和替米考星在人工培养基中对Mmm SCB237菌株的MICs值分别比在牛血清中高64倍、8倍和64倍，MmmSC Tan8菌株的情形也与此相似。当血清热失活之后，会产生MIC值比人工培养基和未处理血清中MIC值都要高的结果。
Baggott等[14]从具有BRD症状的青年小牛鼻拭子中分别分离出溶血性曼氏杆菌（Mannheimia haemolytica，Mh）26株、多杀性巴氏杆菌（Pasteurella multocida，Pm）14 株以及牛支原体（Mycoplasma bovis，Mb）34株，然后测定加米霉素对这3种菌的体外最低抑菌浓度（MIC）值。结果表明，加米霉素对3种菌的MIC值范围分别为：Mh0.5~2.0µg/m L、Pm0.125~2.0µg/m L、Mb>16 µg/mL）。而当大环内酯类耐药基因erm（42）和msr（E）- mph（E）存在时，加米霉素对40株多杀性巴氏杆菌（Pm）和29株溶血性曼氏杆菌（Mh）最小抑菌浓度MIC值的变化研究结果显示[15]，在检测不到erm（42）和msr（E）- mph（E）的大环内酯类敏感菌中，加米霉素对8株Pm和7株Mh的MIC值范围分别为0.25~0.5、0.5~1mg/L；erm（42）和msr（E）- mph（E）三种基因同时存在的分离株中，加米霉素对Pm和Mh的MIC值范围分别为16~64、32~64mg/L；仅携带erm（42）基因的分离株，加米霉素对Pm和Mh的MIC 值范围分别为2~4、4mg/L；仅携带msr（E）- mph（E）基因的Pm测得加米霉素的MIC值高达32mg/L，该试验中未分离到仅携带msr（E）- mph（E）基因的Mh，故未检测其MIC值。作为一类新的大环内酯类药物，加米霉素对引起牛呼吸系统疾病的病原菌有较高的抗菌活性，但在大环内酯类耐药基因出现后，加米霉素的MIC值也相应升高。