小鼠大脑小脑的组织学研究(3)
1.2.1.7 光学显微镜观察将切片标本分别在 10 倍、40 倍、100 倍（油镜）物镜下观察组织形态结构与位置并作出分析。在开始观察切片标本之前，确保所使用的显微镜的镜头是清洁的；在将标本放到显微镜观察可以先用肉眼大致观察一下组织在切片上具体位置及染色情况，这样可以获得有关切片的大体信息，并且把标本移到光轴中央时更容易，观察切片通常先使用低倍物镜确定在高倍镜下需要观察的目标区后，再将目标区移到视野的中央，然后将低倍镜转至高倍镜即可【7】。
1.2.2 脑组织透射电镜样品制作
1.2.2.1 半薄石蜡切片制作透射电镜的方法制作步骤：1）脱蜡：将石蜡半薄切片进入 100%二甲苯溶液中 2h，中间更换一次二甲苯；2）水化：无水酒精 20min，1 次，95%酒精 5min，1 次，90%酒精 3min 1 次，80%酒精 3min 1 次，最后用 0.1mol/L pH7.2 PBS 溶液中漂均亮后，洗 3 次，5min/次；3）固定：在 1%锇酸固定液中固定 20min ，最后 0.1mol/L pH7.2 PBS 溶液中漂洗 2 次，5min/次;4)脱水：50%、70%、80%、90%酒精各脱水一次，每次 10min，无水酒精 2 次，5min/次；5）包埋；6）聚合：70℃温箱 20h；7）制作超薄切片；8）染色：2%醋酸双氧铀染色 30min；柠檬酸铅染色 20min。