重组大肠杆菌表达肠激酶的质量控制(2)
肠激酶也是一种丝氨酸蛋白酶，由两个分别称作重链和轻链的亚基组成，其中有催化活性的是轻链，而重链参与和胰蛋白酶原结合中，这两个亚基通过一对二硫键连接，若断裂则会释放出轻链参与一系列生理反应，但是EK活性主要受重链影响，跟轻链关系不是太大。
据调查市场上1000 u/ml包装的肠激酶能卖到1万块，可见若自己最优化生产肠激酶将给公司带来巨大效益。从十二指肠组织中纯化的肠激酶常常含有其他蛋白水解酶的污染，从而限制了其广泛的应用，近年来所做的尝试多是克隆与表达235个氨基酸的具有酶学活性的肠激酶轻链（EKLC），国内外一直都有通过重组大肠杆菌的表达研究来生产重组肠激酶的项目，但大部分都表现出产量低，无法大规模生产的缺点。
该实验是利用万邦医药生物制品车间发酵获得的重组大肠杆菌表达来制备肠激酶粗酶液并经过分离、纯化、变复性、酶切、阳离子层析等步骤最终得到纯的肠激酶。其中不可或缺的环节就是多次取样进行电泳分析，我们采用了SDS-PAGE技术代替一般电泳、曲线测定替代单点测定蛋白浓度和进行酶活性分析，通过对以往分析方法的改善优化，使得整个生产工艺更为有效地进行，也节省了生产资本，提高了肠激酶的产率，为基因工程领域开创新天地。
带电颗粒在电场作用下，向着与其电性相反的电极运动的现象称为电泳，利用带电粒子在电场中移速不同达到物质分离的技术叫作电泳技术。电泳技术已广泛的应用于分析化学、生物化学等许多领域。
物质颜色是其对不同波长的光具有选择性吸收作用。将不同波长的单色光按顺序通过 一定浓度的有色溶液，然后测每一波长下有色溶液对光的吸光度，接着以波长为横坐标，吸光值为纵坐标作图，这样就能够得到一条光吸收曲线，该曲线更清楚地显示出物质对不同波长光的吸收特点。
我们所知光吸收程度最大处对应的波长称为最大吸收峰，某物质，不同浓度的最大吸收峰不变，但是对应的吸光值是不同的，发现吸光度随物质浓度的增大而变大，这就是物质定量分析的根本依据。
朗伯-比尔定律
其中：A为吸光度，I0为入射光强度，It为透射光强度, b为液层厚度,k为比例常数