植物作为自然界中不可少的要素，给我们提供了一个巨大资源宝库，它也面临着严峻的病虫害的考验。人们滥用化学农药所带来的严重后果让我们陷入了困境。在困境中我们开始思考,怎样能够既有效防止植物病害又避免化学农药带来的巨大危害。在我们的实际应用中出现具有抗药性病原菌的种类日渐丰富，生物农药因其与环境的高相容性、低危害性且持久作用性而被人们日益重视。

植物内生菌是指那些存活在健康植物的各种器官和组织中却不会对宿主造成危害[10]，并且与植物构成和谐共生关系的微生物[11]。被感染后的宿主植物要通过特定方法才能发现它的存在,简单来说可以通过组织分离法将内生菌分离出来。更精确的可以用分子生物学的方法来实现，如可以提取植物组织的DNA，通过基因比对来发现其内生菌。植物内生菌多样性在一定程度上，也体现了生物多样性。内生菌的生长情况和宿主植物有着紧密的关系，同时，这些内生菌也会影响宿主植物的生长情况。有学者通过研究提出它们二者可能源!自`吹冰'文"论(文`网[www.chuibin.com存在协同进化的关系，因此，它们可能会表达出相似或者相同的次生代谢物。这些次生代谢物对二者的生长都会产生巨大影响。抗肿瘤诱发因子、抗生素、抗氧化、促植物生长因子等特殊活性物质所表现出来的特殊结构和其生物活性，为我们筛选新的药物活性物质提供了有利条件，进而推动农业和医疗的进步。

自然界存在的二十几万种植物给我们提供了非常丰富的真菌资源库。因此，植物内生真菌将会成为未来非常具有发展前景的生物防治原料，为生物农药的研究提供了大量思路。

对植物和其内生菌有效功能成分的进一步研究可以让我们明确认识他们的作用机理，这样就带来了一个新的课题：如何从这样一个资源库高效提取有效成分。这一课题的深入研究必定会给许多医药企业带来产业链和生产效率的提升。

 2 材料与方法

2.1试验材料与设备

2.1.1 实验材料

在江苏师范大学泉山校区采集到的不同地点的、树体健壮、没有发现病虫害现象的杜仲根、茎等组织。用来分离纯化内生菌的杜仲组织都采自杜仲树。采样后立即用保鲜袋包裹，如果不能立即完成实验则应该放在4℃低温冰箱内保存。

2.1.2 培养基 

我们分离杜仲内生细菌所用的培养基有：M1、M2、M6、M11，分离内生真菌采用M3、M4、M5[12]，分离内生放线菌采用M6、M7、M8、M9。我们用于酶活检测的培养基有：M13-M16。