本论文利多相分类学方法技术来分析鉴定实验菌株的进化地位, 并用进化地位相近的菌株N. harenae WS-26T与分离菌株的16S rRNA基因序列的相似性和系统发育来进行比较,来确定该菌种KLBMP S 0027T是否属于新菌种。2 材料与方法2.1 供试材料2.1.1实验菌株菌株 KLBMP S 0027T为从海边土壤样品中分离所得,使用的参照菌株是 N.harenae WS-26T。2.2 培养基各培养基加入20%的琼脂和3%的 NaCl,以下容量都为 1000ml。(1)察氏培养基:蔗糖 30.0g,NaNO3 2.0g,K2HPO4 1.0g,MgSO4·7H2O 0.5g,KCI 0.5g,FeSO4 0.01g,pH 7.2(2)麦芽膏-酵母膏培养基源`自*吹冰?文.论~文`网[www.chuibin.com(ISP 2) :酵母膏 4.0g,葡萄糖4.0g,麦芽膏 10.0g,微量盐溶液 1ml,pH 7.2(3)燕麦片培养基(ISP 3) :燕麦片 20g(加 1000ml 水煮 20min,然后经离心或过滤得澄清滤液并补水至1000ml) ,微量盐溶液 1ml,pH 7.2(4)甘油-天门冬酰胺培养基(ISP 5) :L-天门冬酰胺 1.0g,甘油 10.0g,K2HPO41g,微量盐溶液 1ml,pH 7.2(5)无机盐淀粉培养基(ISP 4) :可溶性淀粉 10g ,K2HPO4 1.0g,MgSO4·7H2O1.0g,CaCO3 2.0g, (NH4)2SO4 2.0g,微量盐溶液 1.0ml,pH 7.2(6)营养琼脂培养基:蛋白胨(鱼粉颗粒)10g,牛肉膏 5.0g,pH 7.22.3 实验方法2.3.1形态和培养特征2.3.1.1形态观察电镜观察[16]:在 ISP 2 固体平板上挖槽后 28℃埋片培养放线菌,21 天后取出埋片,喷金后置扫描电镜下形态观察。

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