引言

随着我国社会经济的发展，人们生活水平的显著提高，人类的寿命逐渐延长，我国面临的老龄化问题也逐渐加剧，所伴随的老年骨质疏松等老年疾病发病率逐年提高[1]。因此，寻求一种切实有效可促进骨质疏松性骨折愈合但又不影响骨组织功能的治疗方法一直是人们研究的重要课题之一。

辛伐他汀是一种降脂类汀类药物，其主要的药理作用是抑制内源性胆固醇的合成，作为血酯调节剂，在临床的应用上，该药普遍用于对冠心病和高胆固醇血症的治疗[2]。然而，自1999年首次报道他汀类药物可以促进骨形成的作用潜能以来［3]，备受骨科界学者们的关注。在动物（SD大鼠）实验中得到证实，该药是羟甲基戊二酰辅酶A还原酶抑制剂，而荧光素酶活性可被甲羟戊酸阻断，骨的形成作用与此酶的抑制有关系[4]。他汀类药物可以有效地降低股骨颈骨折的发病率［5］，可以增加骨的密度和降低骨折发生的危险性[6]。所以，该药对于目前临床患病率较高的骨质疏松病、脊柱融合术后的假关节的形成、骨折的愈合不良等病症的治疗提供了最具有临床开发潜能的药品[7-9]。

    目前，成骨细胞主要负责骨基质的合成、分泌以及矿化，是最终骨形成的重要功能细胞[10]。而成骨细胞的增殖、粘附与分化被抑制是患骨质疏松病的一个重要的病理机制，从而致使形成非胶原性蛋白和骨胶原蛋白缺乏，使得骨皮质在松质骨内的延伸部分变得易断裂和稀薄，也使骨质和骨量都明显降低[11]。成骨细胞不仅决定了骨的形成，而且对破骨细胞对骨的吸收起调节作用，其粘附性对最终形成的骨质有很大程度上的决定性。因此，提高成骨细胞的粘附性以及分化水平是防治骨质疏松症等相关病的关键。论文网

    在临床的应用及研究表明，国内亦报道辛伐他汀药物有促进骨质疏松大鼠骨生成的作用[12]。但是辛伐他汀如何在细胞学水平对早期成骨细胞粘附和分化以及它们之间的关系的研究尚不清楚。本次实验，选取SD大鼠的乳鼠（出生1-3天内）的头盖骨组织进行体外培养，对离体成骨细胞添加浓度为1×10-7 mol/L的辛伐他汀（1×10-7 mol/L浓度的辛伐他汀对成骨分化的促进效果是最佳的[13]）以及加入等量溶剂无水乙醇给其对照，探究辛伐他汀对成骨细胞早期粘附与分化的影响，为研究辛伐他汀对骨质疏松症等相关病的治疗提供科学的实验依据。

1 材料与方法

1.1供试材料

1.1.1动物

   新生健康SD大鼠（出生1-3天内）3只，由徐州医学院动物实验中心提供，对实验动物（SD大鼠）的处置遵循伦理学的标准。

1.2 药品与试剂

药品/试剂 来源

辛伐他汀 日本Servier公司

95%无水乙醇 上海苏懿化学试剂有限公司

50%戊二醛 上海苏懿化学试剂有限公司

PBS缓冲液 美国Hyclone公司

cck8溶液 上海碧云天生物技术有限公司

DMEM高糖培养基 美国Gibico公司

Hoechst 33258溶液 上海碧云天生物技术有限公司

BCIP/NBT染色工作液 上海碧云天生物技术有限公司

RITC标记的鬼笔环肽溶液 美国Invitrogen公司

1.3 方法

1.3.1 DMEM高糖培养基的配置