高效液相色谱法测定烤肉中的苯并芘(5)
1.5.2 高效液相色谱法分析烤肉的前处理方法
高效液相色谱法是分析检测烤肉中苯并芘的较好分析方法，但是烤肉的成分复杂，干扰物多，主要含有水、脂肪类化合物、芳香烃、蛋白质、有机酸等，而PAHs的含量相对来说很低，难以直接进行分析检测，且大量的脂质、疏水蛋白质等不仅干扰苯并芘的定量分析，甚至会污染液相色谱柱，必须经过一定的前处理才能进行分析检测。
目前，对烤肉中苯并芘分析检测的主要前处理方法有传统的索氏提取法、超声波提取法以及技术较新的固相萃取法、固相微萃取法、浊点萃取法、加速溶剂萃取法、超临界流体萃取法等等。
（1） 索氏提取法（Soxhlet Extraction）
索氏提取法在食品的残留有害物质的分析检测前处理中已经广泛应用数十年，是经典的预处理方法，并常作为其他方法的参照标准。样品经过皂化后在索氏提取器中加热回流、萃取、浓缩、纯化等一系列处理再进行测定分析。索氏提取法的优点是提取效果好、回收率高，但是提取样品量大，操作比较麻烦，花费时间较长，溶剂使用量大，并需要进一步浓缩。
（2） 超声波提取法（Ultrasonic Extraction）
超声波提取法利用超声波产生的强烈振动和高加速度产生乳化、扩散、击碎等效果，加上声波空化效应使固体样品分散，增大样品和萃取溶剂的接触面积从而加速目标物质被溶剂萃取的一种萃取方法。超声波提取法是美国环境保护局推荐的PAHs提取方法之一，其在常温下就能进行，因而避免了高温影响对热不稳定的提取成分，但是超声波可能造成一些不稳定化合物的结构的破坏，PAHs结构比较稳定，因此适用。超声波提取法另外还有耗费时间少，溶剂用量少，操作简单且回收率较高等优点，已被广泛应用于环境和食品中PAHs的提取。
（3） 固相萃取法（Solid-Phase Extraction，SPE）
固相萃取法建立在传统的液液萃取基础之上，利用物质间相似相溶原理和HPLC中的固定相基本知识而逐渐发展起来的，其基于样品在两相之间的分配差异即在固相和液相之间的分配不同进行分离的，利用固体吸附剂吸附液体样品中的目标物质，与基体及其它干扰物分离，而后再用加热解吸或洗脱液洗脱，从而分出目标物质并达到富集目的[ ]。根据所要分析的物质性质、样品种类等选择合适的萃取柱和洗脱液及其他其它影响因素的优化条件，可以使萃取、富集、净化几个步骤合并为一步完成，大大缩短了时间。
固相萃取法应用广泛且越来越受欢迎，凭借其过程简单、溶剂用量少、花费时间少、重现性好、回收率高、可靠安全等诸多优点，有逐渐取代传统液液萃取的趋势[ ]。
（4） 固相微萃取法（Solid-Phase Microextraction，SPME）
固相微萃取法是建立在固相萃取法基础上于20世纪90年代发展起来的一项新兴样品前处理技术，其同样利用目标物质与溶剂间的相似相溶原理，石英纤文表面的固定相吸附所要分析的特定物质，将其从样品中提取出来，然后使用液相的流动相或气相的高温将组分洗脱下来进行分析检测。固相微萃取装置形如一个微量进样器，使用时萃取头浸入液体或液上萃取浓缩样品中的待测物质，然后萃取头收回萃取头鞘内，不经任何溶剂洗脱即可直接进入气相色谱仪器气化室，待测物质在气化室内解吸附后，靠流动相导入色谱柱，便完成提取、分离、浓缩的全过程[ ]。固相微萃取法操作简单，时间短，可直接进样，可以不使用萃取溶剂，称得上是真正意义上的固相萃取。
（5） 浊点萃取法（CloudPoint Extraction，CPE）
浊点萃取法是近年成为热点的一项新型前处理方法，其主要基于表面活性剂的相分离现象，在有机、蛋白质及金属离子等样品的分离和预浓缩中都有高效表现，和传统的液液萃取比较，浊点萃取法的优势在于处理速度快、操作简便、萃取效率高等，因为避免了有机溶剂的使用而更加经济环保。
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